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实验苏木素(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色法,简称HE染色法。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内
的染色质与胞质内的核酸着紫色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染
色提供良好的核浆对比染色,是细胞化学染色常用的一种方法。
实验步骤:
1.样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1x105/ml,滴加吁盖玻片上(置于6孔板
中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS洗涤3次
2.样品固定: 95%Z醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min
3.染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤
4.色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1 %盐酸酒精溶液分色数秒,睐水洗涤
5.染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤
6.吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片
7.若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可