其他品牌 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
微量法 100T/96S
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.1)是植物光呼吸代谢中的关键酶,也是光下合成草酸的关键酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。
测定原理
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙,在324nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)。
试剂组成和配制
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存,临用前加 5mL 双蒸水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:液体 2mL×1 支,4℃保存。酶液提取按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。12000g, 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
酶活性计算公式
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下1.按照蛋白浓度计算酶活性定义:每毫克蛋白每分钟氧化 1nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。GOX 活性(nmol/min /mg prot)= dA×∆ε×V 反总÷(V 样×Cpr)÷T= 392×△A÷Cpr乙醇酸氧化酶测试盒