乙醇酸氧化酶测试盒

分光光度法 50 管/48 样 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

测定意义 

乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代谢中的关键酶，也是光下合成草酸的关键酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。 

测定原理 

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙，在 324nm 有特征吸收峰。 

自备实验用品及仪器 

天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿。 

试剂组成和配制 

提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂一：液体 35mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加 10mL 双蒸水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。 

试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。酶液提取按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。12000g， 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

酶活性计算公式 

1．按照蛋白浓度计算

酶活性定义：

每毫克蛋白每分钟氧化 1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。GOX 活性（nmol/min /mg prot）= dA×∆ε×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T= 392×△A÷Cpr乙醇酸氧化酶测试盒