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一、人血管生成素1(ANG-1)ELISA科研试剂盒:试剂盒概述人血管生成素1(Angiopoietin-1, ANG-1)ELISA科研试剂盒是用于检测人类血清、血浆、细胞培养上清或其他生物样本中ANG-1含量的酶联免疫吸附试验(ELISA)工具。ANG-1是一种在血管生成、血管成熟和稳定化中发挥关键作用的蛋白质,广泛应用于血管生物学、肿瘤学、心血管疾病、炎症及其他相关领域的科研。
ELISA试剂盒通过特异性抗体识别并结合样本中的ANG-1,经过显色反应,定量检测ANG-1的浓度。该试剂盒具备操作简便、特异性强、灵敏度高等优点,适用于实验室科研使用,帮助研究人员了解ANG-1在生物学过程中的表达水平和功能。
二、人血管生成素1(ANG-1)ELISA科研试剂盒:血管生成素1(ANG-1)背景信息ANG-1是一种关键的血管生成因子,通过与Tie2受体结合调控血管的形成和稳定。ANG-1在体内主要由周细胞和成纤维细胞分泌,能够通过促进内皮细胞之间的粘附和相互作用,抑制血管通透性,维持血管的完整性和功能稳定性。与血管生成素2(ANG-2)共同调控血管生成过程,ANG-1发挥着促进血管成熟的作用,而ANG-2则在血管重构和病理状态下具有相反的效果。
ANG-1的功能涉及多种生理和病理过程,包括:
血管生成:ANG-1通过激活Tie2受体,促进内皮细胞的存活、迁移和血管内皮的稳定。
血管成熟与稳定化:ANG-1在血管生成的晚期阶段起作用,防止血管过度渗漏并增强血管壁的强度。
肿瘤学:ANG-1在肿瘤血管生成和肿瘤进展中起重要作用,是癌症研究中的热点之一。
炎症反应:ANG-1可以通过减少血管通透性和抑制炎性因子的释放,减少炎症反应的发生。
三、试剂盒原理人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒采用双抗体夹心法原理,检测样本中的ANG-1含量。首先,微孔板预包被有针对ANG-1的特异性抗体,当将样本加入孔中时,样本中的ANG-1与抗体结合形成抗原-抗体复合物。经过一系列洗涤步骤后,去除未结合的物质,加入酶标二抗,该二抗同样与ANG-1结合。最后,通过加入底物显色反应,形成颜色的深浅与样本中ANG-1的浓度成正比。反应终止后,用酶标仪在450 nm波长下读取吸光值,并通过标准曲线计算出样本中ANG-1的浓度。
四、试剂盒参数
试剂盒名称:人血管生成素(ANG-1)ELISA科研试剂盒
检测原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)—双抗体夹心法
检测靶标:血管生成素1(ANG-1)
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本
检测范围:通常为 0.1-100 ng/mL,具体检测范围根据试剂盒批次可能有所不同
灵敏度:0.5-1.0 pg/mL,视具体试剂盒版本而定
样本用量:50-100 µL,每孔
检测时间:3-5小时,包括加样、孵育、洗涤、显色等步骤
重复性:板内和板间的变异系数 (CV%) 一般小于 10%
检测波长:450 nm(带 570nm 或 630nm 校正波长)
标准曲线:根据标准品浓度梯度绘制标准曲线,用于定量分析
保存条件:2-8°C保存,避免反复冻融
有效期:6-12 个月,根据具体批次确定
操作步骤:
样本稀释后加入微孔板;
孵育后加入酶标二抗;
进行显色反应,加入终止液;
在酶标仪上测定吸光值。
适用范围:主要用于科研中的ANG-1含量检测,包括血管生物学、肿瘤学、心血管疾病及相关领域。
五、试剂盒组成及配件
包被微孔板:预包被有针对ANG-1的特异性抗体。
标准品:ANG-1标准品,提供不同浓度的标准用于绘制标准曲线。
酶标二抗:与ANG-1结合的酶标记抗体,用于检测抗原-抗体复合物。
洗涤缓冲液:用于清除未结合的抗原、抗体和其他干扰物质。
显色液:TMB底物,酶催化显色,用于可视化抗原浓度。
终止液:用于终止显色反应。
样品稀释液:用于稀释生物样本,确保样本浓度在检测范围内。
板封膜:用于封闭微孔板,避免样品和试剂挥发。
使用说明书:详细的操作流程和注意事项。
六、操作步骤
样本和标准品准备:按照说明书对样本进行稀释,准备好不同浓度的标准品。
加样:将标准品和样本分别加入微孔板的相应孔中,每个样本建议做至少两个重复孔。
孵育:在温控环境下孵育,确保抗原与抗体充分结合。
洗板:用洗涤缓冲液多次洗板,去除未结合的抗原、抗体及其他干扰物质。
酶标二抗反应:加入酶标二抗,孵育后重复洗板步骤。
显色反应:加入显色液,酶催化底物生成有色产物。
终止反应:加入终止液,固定颜色变化。
数据读取:用酶标仪在450 nm波长下读取吸光度,使用标准曲线计算样本中的ANG-1浓度。
七、试剂盒优势
高灵敏度:该试剂盒检测灵敏度高,能够检测低至0.5 pg/mL的ANG-1浓度,适合低丰度蛋白检测。
特异性强:利用双抗体夹心法,确保对ANG-1的高特异性检测,避免交叉反应。
操作简便:操作流程简单,易于掌握,适合各种规模的实验室使用。
广泛适用性:适用于多种生物样本类型,包括血清、血浆、细胞培养上清等,适应性广泛。
重复性好:板内和板间变异系数均小于10%,确保实验结果的准确性和可靠性。
八、应用领域
血管生物学:研究ANG-1在血管生成、血管稳定化中的作用。
肿瘤学:探讨ANG-1在肿瘤血管生成和肿瘤进展中的调控作用。
心血管疾病:分析ANG-1在心血管疾病如高血压、动脉粥样硬化中的调控作用。
炎症研究:研究ANG-1在炎症反应中的作用,特别是在血管通透性调节中的影响。
药物筛选:用于评估药物对ANG-1表达和功能的影响,寻找针对血管生成的潜在治疗靶点。
九、注意事项
操作前请仔细阅读说明书,严格按照步骤进行。
样本处理应避免反复冻融,以免影响检测结果的准确性。
样本中可能存在影响实验结果的干扰物,应对样本进行适当稀释或预处理。
试剂盒为一次性使用,试剂不能混用或重复使用。
实验中应避免交叉污染,尤其在加样和洗板步骤时要格外小心。
十、总结人血管生成素(ANG-1)ELISA科研试剂盒是一款高效、精准的工具,适用于检测血清、血浆等样本中的ANG-1浓度,广泛应用于血管生成、肿瘤学、炎症及心血管疾病研究。该试剂盒灵敏度高、特异性强,为科研人员提供了可靠的ANG-1定量检测方法,有助于推动相关领域的基础研究和临床应用开发。