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人白细胞活化黏附因子ELISA科研试剂盒:人白细胞活化黏附因子(Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM)ELISA科研试剂盒是用于定量检测血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本中ALCAM含量的工具。ALCAM是一种细胞黏附分子,在细胞间的相互作用中发挥重要作用,尤其在免疫反应、肿瘤转移、神经系统发育及组织修复等生理和病理过程中。该试剂盒通过酶联免疫吸附试验(ELISA)原理进行检测,具有高灵敏度和特异性,广泛应用于免疫学、肿瘤学、神经生物学等研究领域。
二、人白细胞活化黏附因子ELISA科研试剂盒:背景信息
ALCAM属于免疫球蛋白超家族,主要介导细胞-细胞之间的黏附,广泛表达于免疫细胞、神经元、内皮细胞和上皮细胞等。其功能主要包括:
免疫调节:ALCAM在T细胞活化和免疫反应中发挥重要作用,调控白细胞的迁移与活化。
肿瘤转移:在多种癌症中,ALCAM的表达与肿瘤的侵袭和转移密切相关,研究其表达水平对肿瘤诊断和预后评估具有重要价值。
神经发育:ALCAM在神经系统发育中促进神经元的迁移、延伸和分化,涉及神经回路的形成和修复。
组织修复:ALCAM参与组织损伤后的修复过程,特别是在再生医学中发挥作用。
由于ALCAM在多种生理和病理过程中的重要性,检测其浓度可以帮助研究者更好地理解其在免疫反应、肿瘤发生、神经系统发育等方面的功能。
三、试剂盒原理
人ALCAM ELISA科研试剂盒采用双抗体夹心法进行定量检测。微孔板预先包被有针对ALCAM的特异性抗体,当样本中的ALCAM与之结合后,形成抗原-抗体复合物。通过一系列洗涤步骤去除未结合的物质,随后加入酶标二抗,二抗与ALCAM结合后,通过显色底物反应生成颜色变化。最终在酶标仪上读取450 nm的吸光度值,样本中ALCAM的浓度通过标准曲线进行定量分析。
四、试剂盒参数
试剂盒名称:人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA科研试剂盒
检测原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)—双抗体夹心法
检测靶标:白细胞活化黏附因子(ALCAM)
样本类型:血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本
检测范围:通常为 0.1-100 ng/mL,具体范围以说明书为准
灵敏度:通常为 1 pg/mL,视具体试剂盒批次而定
样本用量:50-100 µL,每孔
检测时间:约 3-5 小时,依赖于操作步骤
重复性:板内和板间变异系数 (CV%) 通常小于 10%
检测波长:450 nm(带 570nm 或 630nm 校正波长)
标准曲线:通过标准品浓度梯度绘制标准曲线,用于定量分析样本中的ALCAM浓度
保存条件:2-8°C保存,避免反复冻融
有效期:6-12 个月,具体批次以说明书为准
操作步骤:加样、抗原-抗体反应、洗涤、加酶标抗体、显色、终止反应、读数
适用范围:用于科研中的ALCAM含量检测,广泛应用于免疫学、肿瘤学、神经生物学等领域
五、试剂盒组成
包被微孔板:预包被有针对ALCAM的特异性抗体,用于捕获ALCAM。
标准品:提供不同浓度的ALCAM标准品,用于绘制标准曲线。
酶标二抗:特异性结合ALCAM的酶标抗体,帮助检测抗原-抗体复合物。
洗涤液:用于清洗微孔板,去除未结合的物质,降低背景噪音。
显色底物:TMB底物,通过酶促反应生成可检测的颜色。
终止液:用于终止显色反应,确保稳定的颜色变化。
:用于稀释样本,确保浓度在检测范围内。
使用说明书:详细操作步骤和注意事项说明。
六、操作步骤
样本与标准品准备:按照说明书要求,对样本进行稀释,准备不同浓度的标准品。
加样:将样本和标准品加入微孔板,建议每个样本做重复检测。
孵育:在特定温度条件下孵育,确保样本中的ALCAM与预包被的抗体充分结合。
洗板:用洗涤液多次清洗微孔板,去除未结合的物质。
加酶标二抗:加入酶标二抗,孵育后再次洗板。
显色反应:加入显色底物,通过酶促反应产生颜色变化。
终止反应:加入终止液,固定颜色变化。
读数:使用酶标仪在450 nm波长下读取吸光度值,根据标准曲线计算样本中ALCAM的浓度。
七、试剂盒优势
高灵敏度:试剂盒可检测低至1 pg/mL的ALCAM,适合低丰度蛋白的检测。
特异性强:双抗体夹心法确保了对ALCAM的高特异性检测,避免交叉反应。
操作简便:操作步骤简便易行,适合不同规模的实验室使用。
重复性好:板内和板间变异系数低,确保结果的准确性和一致性。
应用广泛:适用于多种生物样本类型,能够广泛应用于多种科研领域。
八、应用领域
免疫学研究:ALCAM在免疫调控中的作用,特别是T细胞活化和炎症反应。
肿瘤学研究:ALCAM在癌症中的表达与肿瘤的侵袭和转移相关,研究其作为肿瘤生物标志物的潜力。
神经科学研究:ALCAM在神经系统发育中的作用,特别是在神经元迁移和轴突引导中的功能。
组织再生与修复:ALCAM在组织损伤后的修复和再生医学中的潜在应用。
药物筛选:用于检测ALCAM作为潜在药物靶点的应用,评估药物对其表达的影响。
九、注意事项
试剂盒在操作前应仔细阅读说明书,并严格按照步骤进行操作。
样本在检测前应避免反复冻融,以保持样本的稳定性。
操作过程中应避免样本交叉污染,特别是在加样和洗板步骤中。
试剂盒为一次性使用,各组分不能混用或重复使用。
试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断。
十、总结
人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA科研试剂盒是一款高效、灵敏的检测工具,广泛适用于免疫学、肿瘤学、神经生物学等多个研究领域。