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人凋亡相关因子(Fas/CD95)ELISA科研试剂盒是一款专门用于定量检测血清、血浆、细胞培养上清等生物样本中Fas/CD95含量的工具。Fas/CD95是一种跨膜蛋白,属于肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族,参与细胞凋亡信号通路的调控,特别在免疫调节、组织发育和癌症中发挥重要作用。该试剂盒采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,具有高灵敏度和特异性,适合用于免疫学、细胞生物学和肿瘤学等领域的基础科研,帮助研究人员定量分析Fas/CD95在不同生物学过程中的表达及功能。
二、人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA科研试剂盒:背景信息
Fas/CD95是一种与凋亡密切相关的受体,其主要功能包括:
细胞凋亡:Fas/CD95与其配体FasL结合后,激活细胞内凋亡信号通路,最终导致细胞程序性死亡。这一过程在维持组织稳态、免疫系统功能以及消除异常细胞(如癌细胞)方面具有重要作用。
免疫调节:Fas/CD95在T细胞和B细胞的发育、成熟及免疫应答中的调节功能显著,尤其在免疫耐受和自身免疫性疾病中发挥重要作用。
肿瘤学:Fas/CD95信号通路的异常可能导致肿瘤细胞逃逸凋亡机制,促进癌症的发生和进展,因此Fas/CD95被视为肿瘤研究中的一个重要靶点。
发育与组织稳态:Fas/CD95不仅在免疫细胞的调控中发挥作用,还参与胚胎发育过程中特定细胞群体的选择性凋亡,维持组织的稳定性和健康。
研究Fas/CD95的表达和功能对于了解多种疾病的病理机制具有重要意义,包括癌症、免疫缺陷、神经退行性疾病以及中的排斥反应等。
三、人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA科研试剂盒:原理
人Fas/CD95 ELISA科研试剂盒采用经典的酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法进行定量检测。微孔板中预包被有特异性抗Fas/CD95的抗体,加入样本后,样本中的Fas/CD95将与捕获抗体结合。洗涤后,加入酶标二抗,二抗与Fas/CD95结合后,通过显色反应形成颜色,颜色的强度与样本中的Fas/CD95浓度成正比。通过酶标仪在450 nm波长下读取吸光度,利用标准曲线对Fas/CD95的浓度进行定量分析。
四、试剂盒参数
试剂盒名称:人凋亡相关因子(Fas/CD95)ELISA科研试剂盒
检测原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)—双抗体夹心法
检测靶标:Fas/CD95
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本
检测范围:通常为 0.1-100 ng/mL,具体范围以说明书为准
灵敏度:一般为 1 pg/mL,具体批次可能有所不同
样本用量:50-100 µL,每孔
检测时间:3-5小时,具体依操作步骤而定
重复性:板内和板间变异系数(CV%)一般小于10%
检测波长:450 nm(带570 nm或630 nm校正波长)
标准曲线:根据标准品浓度梯度绘制标准曲线,进行定量分析
保存条件:2-8°C保存,避免反复冻融
有效期:6-12 个月,具体以批次说明书为准
操作步骤:加样、抗原-抗体结合、洗涤、加酶标抗体、显色反应、终止反应、读数
适用范围:用于科研中Fas/CD95含量的检测,广泛应用于免疫学、肿瘤学、细胞生物学等领域
五、试剂盒组成
包被微孔板:预包被有针对Fas/CD95的特异性抗体,用于捕获样本中的Fas/CD95。
标准品:提供不同浓度的Fas/CD95标准品,用于绘制标准曲线。
酶标二抗:与Fas/CD95结合的酶标抗体,用于检测抗原-抗体复合物。
洗涤液:用于洗涤微孔板,去除未结合的成分,降低背景噪音。
显色液:TMB底物,经过酶促反应生成颜色。
终止液:用于终止显色反应,确保颜色稳定。
样品稀释液:用于稀释样本,确保浓度在检测范围内。
板封膜:用于在孵育期间封闭微孔板,避免蒸发。
使用说明书:提供详细的操作步骤和注意事项。
六、操作步骤
样本准备:根据说明书稀释样本及标准品,确保样本浓度在检测范围内。
加样:将样本和标准品加入微孔板中,每个样本应做重复测试。
孵育:在适当的温度下孵育,确保样本中的Fas/CD95与捕获抗体结合。
洗板:用洗涤液多次洗涤微孔板,去除未结合的物质。
加酶标二抗:加入酶标二抗,孵育并再次进行洗板操作。
显色反应:加入TMB显色底物,反应后产生颜色。
终止反应:加入终止液,停止显色反应,固定结果。
读数:使用酶标仪在450 nm波长下读取吸光值,并通过标准曲线计算样本中Fas/CD95的浓度。
七、试剂盒优势
高灵敏度:本试剂盒可检测低至1 pg/mL的Fas/CD95,适合低丰度样本的检测。
特异性强:双抗体夹心法确保了对Fas/CD95的高特异性检测,避免交叉反应。
操作简便:实验步骤简单明了,适合常规实验室操作。
重复性好:板内和板间的变异系数低,确保了实验结果的准确性和一致性。
适用范围广:适用于多种类型的生物样本,广泛应用于免疫学、肿瘤学和细胞生物学等研究领域。
八、应用领域
免疫学研究:Fas/CD95在免疫细胞凋亡、T细胞活化及免疫耐受中的功能研究。
肿瘤学研究:研究Fas/CD95信号通路在肿瘤细胞凋亡及抗凋亡机制中的作用,评估其在中的潜在价值。
细胞生物学研究:Fas/CD95在细胞凋亡过程中的作用,特别是在细胞生长调控及发育中的功能。
自身免疫性疾病研究:研究Fas/CD95在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等疾病中的作用。
药物筛选:用于筛选能影响Fas/CD95信号通路的药物,评估其在凋亡相关疾病中的潜力。
九、注意事项
操作前应仔细阅读说明书,严格按照操作步骤进行实验。
样本在检测前应避免反复冻融,以保证样本的完整性和稳定性。
实验过程中应避免样本交叉污染,特别是在加样和洗板时应格外小心。
试剂盒仅供科研使用,不能用于临床诊断。
标准品和试剂不可与其他批次的产品混用,以确保实验结果的准确性。
十、总结
人凋亡相关因子(Fas/CD95)ELISA科研试剂盒是一款灵敏、可靠的工具,广泛应用于凋亡研究、免疫学、肿瘤学等多个研究领域。通过定量检测Fas/CD95,科研人员可以深入了解其在凋亡调控、肿瘤发生及免疫调节中的作用,为相关疾病的机制研究和治疗开发提供重要支持。