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人活化素A(Activin-A)ELISA科研试剂盒是一款专门用于定量检测血清、血浆、细胞培养上清或其他生物样本中活化素A浓度的工具。活化素A是转化生长因子-β(TGF-β)家族的成员之一,广泛参与调节多种生物学过程,包括细胞增殖、分化、胚胎发育、免疫反应、炎症调控及生殖等方面。该试剂盒利用酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,灵敏度高、特异性强,适用于基础科研领域,帮助科研人员研究活化素A在多种生理及病理过程中的作用。
二、活化素A(Activin-A)背景信息
活化素A是一种二聚体糖蛋白,由两个相同的βA亚基通过二硫键连接而成。它在体内具有广泛的生物学功能,主要包括:
细胞增殖与分化:活化素A能够调节多种细胞类型的生长和分化,包括造血干细胞、神经细胞、肌细胞等。
生殖功能调节:活化素A在调控卵泡发育和性激素分泌方面发挥重要作用,是生殖生物学研究中的一个重要因子。
免疫与炎症反应:在炎症反应中,活化素A通过影响细胞因子的分泌和免疫细胞的活性参与免疫调控。
肿瘤学:活化素A在肿瘤的发生、发展和转移中扮演复杂的角色,其表达水平的变化可能与多种肿瘤相关。
研究活化素A的表达水平有助于了解其在各种生理病理过程中的作用,如炎症性疾病、自身免疫疾病、肿瘤、纤维化、代谢紊乱等。
三、试剂盒原理
人活化素A (Activin-A)ELISA科研试剂盒采用双抗体夹心法原理。首先,微孔板中包被有针对活化素A的特异性抗体,加入的样本中若含有活化素A,则其与捕获抗体结合形成复合物。接着,加入酶标二抗,二抗与活化素A结合。随后,通过加入底物显色反应生成颜色,吸光度的强弱与样本中活化素A的浓度成正比。最后,用酶标仪在450 nm波长下读取吸光值,依据标准曲线对样本中的活化素A浓度进行定量分析。
四、试剂盒参数
试剂盒名称:人活化素A (Activin-A)ELISA科研试剂盒
检测原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)—双抗体夹心法
检测靶标:活化素A(Activin-A)
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本
检测范围:通常为 0.1-100 ng/mL,具体范围以说明书为准
灵敏度:一般为 0.5-1.0 pg/mL,视具体批次而定
样本用量:50-100 µL,每孔
检测时间:3-5小时,具体依照实验步骤
重复性:板内和板间变异系数(CV%)通常小于10%
检测波长:450 nm(带 570nm 或 630nm 校正波长)
标准曲线:根据标准品浓度梯度绘制标准曲线,用于定量分析
保存条件:2-8°C保存,避免反复冻融
有效期:6-12 个月,以试剂盒具体批次为准
操作步骤:加样、抗原-抗体结合、洗涤、加酶标抗体、显色反应、终止反应、读数
适用范围:适用于科研中的活化素A含量检测,广泛应用于细胞生物学、免疫学、肿瘤学、生殖生物学等领域
五、试剂盒组成
包被微孔板:预包被有特异性抗活化素A抗体,用于捕获样本中的活化素A。
标准品:提供不同浓度的活化素A标准品,用于绘制标准曲线。
酶标二抗:与活化素A结合的酶标抗体,用于检测抗原-抗体复合物。
洗涤液:用于洗涤微孔板,去除未结合的成分,减少背景噪音。
显色底物:TMB底物,通过酶催化显色反应产生可测颜色。
终止液:用于终止显色反应,固定颜色变化。
样品稀释液:用于样本的稀释,确保样本浓度在检测范围内。
板封膜:用于封闭微孔板,避免试剂和样品蒸发。
使用说明书:详细的操作步骤和注意事项说明。
六、操作步骤
样本准备:按照说明书对样本和标准品进行稀释。
加样:将稀释后的样本和标准品加入到微孔板中,每个样本建议做重复检测。
孵育:在适当的温度条件下孵育,确保抗原和捕获抗体充分结合。
洗板:使用洗涤液清洗微孔板,去除未结合的物质。
加酶标二抗:加入酶标二抗后,孵育并再次进行洗板操作。
显色反应:加入TMB显色底物,反应后产生颜色。
终止反应:加入终止液,停止显色反应,固定结果。
读数:使用酶标仪在450 nm波长下读取吸光度值,并通过标准曲线计算样本中的活化素A浓度。
七、试剂盒优势
高灵敏度:本试剂盒可检测低至1 pg/mL的活化素A,适用于低丰度样本的检测。
特异性强:双抗体夹心法确保了对活化素A的高度特异性,减少交叉反应。
操作简便:实验步骤简洁明了,便于科研人员操作。
重复性好:板内和板间的变异系数较低,确保了结果的准确性和稳定性。
广泛应用性:适用于多种类型的生物样本,广泛用于基础科学研究。
八、应用领域
生殖生物学研究:活化素A在生殖系统调节、卵巢发育及生殖细胞分化中的作用研究。
肿瘤学研究:研究活化素A在肿瘤的发生、进展、转移中的功能及其作为潜在的生物标志物。
免疫与炎症研究:活化素A在免疫调节和炎症反应中的角色,特别是在自身免疫疾病及慢性炎症中的研究。
细胞生物学研究:活化素A对多种细胞类型增殖、分化及细胞命运调控的影响。
药物筛选:用于评估药物对活化素A表达及其功能的调节作用。
九、注意事项
操作前应仔细阅读说明书,并严格按照规定步骤进行操作。
样本在检测前应避免反复冻融,以确保样本的完整性和稳定性。
试验过程中需避免样本之间的交叉污染,尤其在加样和洗板步骤中应格外小心。
试剂盒仅供科研使用,不能用于临床诊断。
实验中的标准品和试剂不能与其他批次的试剂盒混用。
十、总结
人活化素A(Activin-A)ELISA科研试剂盒是一款高效、灵敏的工具,广泛适用于基础科学研究。该试剂盒通过定量分析活化素A在多种样本中的含量,帮助科研人员深入了解其在细胞生物学、免疫学、肿瘤学等多个领域的功能与机制。