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人E选择素(E-Selectin/CD62E)科研试剂盒:人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA科研试剂盒是一种专门用于检测血清、血浆、细胞培养上清等生物样本中E选择素含量的工具。E选择素是一种细胞黏附分子,主要在内皮细胞上表达,负责调节白细胞与血管壁的黏附过程,特别是在炎症反应和免疫调控中发挥重要作用。该试剂盒采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,具备高灵敏度和特异性,适用于基础科研中对E选择素的定量检测,广泛应用于炎症、生物标志物、肿瘤学、心血管疾病等相关领域的研究。
二、E选择素(E-Selectin/CD62E)背景信息
E选择素是选择素家族的一员,也被称为CD62E,是一种在细胞间黏附过程中发挥关键作用的分子,特别在炎症反应、白细胞迁移和肿瘤转移中扮演重要角色:
炎症反应:E选择素主要由活化的内皮细胞在炎症状态下表达,促进白细胞黏附到血管内皮,进而迁移到炎症部位。
免疫调控:在免疫反应过程中,E选择素调节中性粒细胞、单核细胞和T淋巴细胞的迁移,参与先天性和适应性免疫反应。
肿瘤转移:E选择素在肿瘤转移中发挥了重要作用,通过与循环肿瘤细胞的结合,促进肿瘤细胞黏附到血管内皮并迁移到其他组织。
心血管疾病:E选择素在动脉粥样硬化等心血管疾病的早期发挥作用,其表达水平的升高通常与疾病的炎症状态相关。
E选择素在多种疾病的病理生理过程中均扮演了关键角色,检测其表达水平可以为疾病的发生发展提供重要参考。
三、人E选择素(E-Selectin/CD62E)科研试剂盒:原理
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA科研试剂盒采用双抗体夹心法原理。微孔板中预包被有特异性抗E选择素抗体,样本中的E选择素与包被抗体结合。洗涤后,加入酶标二抗,该二抗与E选择素结合后,通过加入显色底物反应形成颜色,颜色深浅与样本中的E选择素浓度成正比。最终使用酶标仪在450 nm波长下读取吸光度,并根据标准曲线定量计算样本中的E选择素浓度。
四、试剂盒参数
试剂盒名称:人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA科研试剂盒
检测原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)—双抗体夹心法
检测靶标:E选择素(E-Selectin/CD62E)
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本
检测范围:通常为 0.1-100 ng/mL,具体范围依批次而定
灵敏度:一般为 0.1-1.0 pg/mL,具体灵敏度以说明书为准
样本用量:50-100 µL,每孔
检测时间:3-5小时,具体依照操作步骤而定
重复性:板内和板间变异系数(CV%)一般小于10%
检测波长:450 nm(带570 nm或630 nm校正波长)
标准曲线:通过标准品浓度梯度绘制标准曲线,用于定量分析
保存条件:2-8°C保存,避免反复冻融
有效期:6-12 个月,具体以批次说明书为准
操作步骤:样本加样、抗原-抗体结合、洗涤、加酶标二抗、显色反应、终止反应、读数
适用范围:适用于科研中E选择素含量检测,广泛应用于炎症、免疫、肿瘤和心血管疾病等领域
五、试剂盒组成
包被微孔板:预包被有针对E选择素的特异性抗体,用于捕获样本中的E选择素。
标准品:提供不同浓度的E选择素标准品,用于绘制标准曲线。
酶标二抗:与E选择素结合的酶标抗体,用于检测抗原-抗体复合物。
洗涤液:用于洗涤微孔板,去除未结合的物质,降低背景信号。
显色底物:TMB底物,通过酶促反应生成颜色。
终止液:用于终止显色反应,确保颜色稳定。
样品稀释液:用于样本稀释,确保样本浓度在检测范围内。
使用说明书:提供详细操作步骤和注意事项。
六、操作步骤
样品准备:根据说明书稀释样本和标准品,确保样本浓度适当。
加样:将样本和标准品加入微孔板中,每个样本建议做重复实验。
孵育:在合适温度下孵育,确保E选择素与捕获抗体结合。
洗板:使用洗涤液清洗微孔板,去除未结合的物质。
加酶标二抗:加入酶标二抗后,孵育并再次洗板。
显色反应:加入显色底物,通过酶促反应产生颜色。
终止反应:加入终止液,停止显色反应,固定结果。
读数:在酶标仪上读取450 nm波长的吸光值,并通过标准曲线计算样本中的E选择素浓度。
七、试剂盒优势
高灵敏度:试剂盒检测灵敏度高,能够检测低浓度的E选择素,适用于低丰度样本的检测。
特异性强:双抗体夹心法保证了对E选择素的特异性检测,避免交叉反应。
操作简便:操作步骤清晰,便于常规实验室进行检测。
重复性好:板内和板间变异系数低,确保了实验结果的稳定性和一致性。
应用广泛:适用于多种类型的样本,如血清、血浆、细胞培养上清等,广泛应用于炎症、肿瘤、心血管疾病等研究领域。
八、应用领域
炎症研究:E选择素在炎症反应中的作用研究,特别是与白细胞黏附和迁移相关的机制。
心血管疾病研究:E选择素在动脉粥样硬化及其他心血管疾病中的早期标志物作用研究。
肿瘤学研究:研究E选择素在肿瘤转移中的作用,特别是其对循环肿瘤细胞的黏附作用。
免疫学研究:E选择素在免疫细胞迁移、免疫反应中的调节作用。
药物筛选:用于评估新药对E选择素表达和功能的调节作用,特别是抗炎药和抗癌药的研究。
九、注意事项
操作前应仔细阅读说明书,严格按照步骤操作。
样本在检测前应避免反复冻融,以确保实验结果的准确性。
实验过程中避免样本交叉污染,特别是在加样和洗板时要特别注意。
试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断。
试剂盒中的标准品和试剂不能与其他批次混用,以确保实验的可靠性。
十、总结
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA科研试剂盒是一款高效灵敏的检测工具,适用于炎症反应、心血管疾病和肿瘤等多种领域的研究。通过定量检测E选择素的水平,科研人员可以深入探讨其在多种疾病中的作用机制,并为相应的疾病研究提供重要的生物标志物参考。