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胰岛素(大鼠超敏)ELISA检测试剂盒
编号 | 产品名称 | 规格 | 单价 | 方法 | 备注 |
EIA2943 | Insulin (rat) 胰岛素(大鼠超敏) | 96T | 询价 | ELISA | 德国DRG |
深圳市科润达为您提供多品种、多方法、多系列的检测试剂,品牌,专业,质量有保证,深得国内各大医院、疾控中心的认可,诚信为本 质量*。
【样品要求】
胰岛素elisa检测试剂盒(大鼠)可使用血清也可使用血浆作为样品。
不能使用明显溶血﹑黄疸和脂血的样品。
血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下离心分离血清。
血浆:将全血采集到含有抗凝剂的离心管,采集后立即离心分离。
样品的储存
样品盖好盖子后,可在实验前2-8℃下储存5天,要更长时间储存,应在-20℃下冻存。在开始实验前应避免反复冻融样品。
样品的稀释
在第一次实验中,要是样品的浓度高于最高标准品,则样品应用按实验步骤所描述的10倍或100倍稀释。在计算浓度时需乘以此稀释度。
例子:
a) 按1:10稀释: 10μL的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)。
b) 按1:100释稀:10μL按a)稀释的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)
检测步骤
所有的标准品、质控品和样品都必须做双份检测以确保所有微孔的检测条件都一样。
1)将所需数目的板条置于板架上。。
2)用一次性吸嘴将标准品﹑质控品和样品分别25μL加入相应的检测孔中。
3)每孔加入25μL的酶联物。
4)充分混合10秒,在此步骤中充分混合非常重要。
5)室温下温育30分钟。
6)快速弃去检测孔中的内含物,每孔加入400μL的洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和精确度。
7)每孔加入50μL的酶复合物。
8)在室温下温育30分钟。
9)快速弃去检测孔中的内含物,每孔加入400μL的洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。
10)每孔加入50μL的底物液。
11)在室温下温育15分钟。
12)每孔加入50μL的终止液终止反应。
13)在加终止液后10分钟内于450±10nm处读取OD值。
【结果计算】
1) 计算标准品﹑质控品和病人样品的平均吸光度。
2) 以吸光率为Y轴,浓度为X轴,按照从标准品中获得的平均吸光率和其相对应的浓度值,绘制一条标准曲线。
3) 利用样品的平均吸光率,在标准曲线上得出其相应的浓度值,
4) 自动方法:使用计算机三次方模式﹑四参数模式或双对数函数的计算机程序可得到结果。
5) 样品的浓度可从标准曲线上直接获取。样品的浓度高于最高标准品的浓度则需进一步稀释。在计算浓度的时候,要乘以样品的稀释倍数。
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