直链淀粉含量检测试剂
盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC4260
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：*50 mL自备；

2. 试剂四：提供125mL空瓶一个；将试剂三：H₂O =9 mL：91 mL混匀，现用现配，2-8℃保存半年；

3. 标准品：10 mg直链淀粉。临用前加入0.1 mL无水乙醇和0.9 mL试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的直链淀粉，2-8℃保存半年。

产品说明：
直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链，直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质，与食品安全息息相关。
直链淀粉和碘形成蓝色络合物，利用乙醇分开样本中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到直链淀粉含量。

技术指标：
低检出限：0.006 mg/mL
线性范围：0.0125-0.6 mg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、*、无水乙醇、EP管、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 称取0.01g烘干样本，加入1mL试剂一，充分匀浆；

2. 80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀；

3. 在步骤2沉淀中加入1mL试剂二（*）振荡 5min；3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀；

4. 在步骤3沉淀中加入5mL试剂四充分溶解，90℃水浴10min，冷却后3000g，25℃离心5min，取上清待测。

二、测定步骤

1. 分光光度计预热30min以上，调节双波长至550nm和485nm，蒸馏水调零。

2. 标准溶液的稀释：取40μL 10mg/mL标准溶液，加入960μL试剂四，充分混匀，配制成0.4mg/mL标准溶液使用，现用现配。（实验中每管需要100μL，为减小实验误差，故配制大体积。）

3. 操作表 (在1.5mL离心管中依次加入下列试剂) ：

三、直链淀粉含量计算
直链淀粉含量（mg/g 质量）=ΔA测定÷（ΔA标准÷C标准）×V样总÷W=2×ΔA测定÷ΔA标准÷W
C标准：标准溶液浓度，0.4mg/mL；V样总：加入试剂四体积，5mL；W：样本质量，g。
注意事项：

1. 反应后建议在20min内检测完成防止褪色。

2. 若A测定大于1，建议样本上清用试剂四稀释后再进行测定；若A测定低于0.03时，可以提取时减少试剂四体积进行测定。注意同步修改计算公式。

实验实例：

1. 取0.01g烘干玉米于研钵中研碎，加入 1mL试剂一，充分匀浆后转移到 EP 管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀，加入1mL试剂二（乙*）振荡5min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入5mL试剂四充分溶解，90℃水浴10min，冷却后3000g，25℃离心5min，取上清，之后按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定=（A测定-A空白）-（A’测定-A’空白）=（0.664-0.003）-（0.474-0.034）=0.221，ΔA标准=（A标准-A空白）-（A’标准-A’空白）=（0.723-0.003）-（0.447-0.034）=0.307，按样本质量计算含量得：直链淀粉含量（mg/g 质量）=2×ΔA测定÷ΔA标准÷W=143.97 mg/g质量。

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