抗坏血酸（AsA）含量检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1230
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂三：液体置于试剂瓶内EP管中。临用前根据用量按照试剂三:试剂二为1:250的体积比例充分混匀，现用现配；

2. 标准品：临用前配制，加入5.679 mL蒸馏水充分溶解，即10 mmol/L AsA；吸取0.04 mL上述溶液，加入0.96mL蒸馏水，混匀，即400 μmol/L AsA。

产品说明:
AsA又称维生素C。AsA是辅酶、自由基清除剂、电子共体/受体和草酸盐与酒石酸盐生物合成的底物等。作为植物细胞中最重要的抗氧化剂，AsA在保护叶绿体免于氧化损伤起着举足轻重的作用，也是衡量农作物产品品质的重要指标之一。
抗坏血酸氧化酶（AAO）催化AsA氧化生成DHA，通过测定AsA的氧化速率，即可计算出AsA含量
技术指标：
检出限：34.725 μmol/L
线性范围：50-1400 μmol/L
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
研钵/匀浆器、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液器和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：

1. 试剂三和标准品现配现用，配制好的 4℃保存，3天内使用完。

2. 如果样本初始吸光值大于1.3，建议将样本用试剂一稀释后进行测定。

实验实例：

1. 取0.1g山楂加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 20min，取上清置冰上，按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定管=A3-A4=1.140-0.763=0.377，ΔA标准管=A1-A2=0.343-0.012=0.331，按样本质量计算含量得：AsA含量(nmol/g 质量) =400×ΔA测定管÷ΔA标准管÷W =4556 nmol/g 质量。

相关发表文献：

1. Yawen Ji,Panpan Zhang,Yixiao Xing,et al. Effect of 1α,25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism. International Journal of Molecular Medicine. October 2018;(IF2.928)

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