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谷*酸脱氢酶(GDH)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号:BC1460
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
溶液的配制:
工作液的配制:临用前将试剂一加入试剂二中混合溶解,置于37℃水浴5min。
产品说明:
GDH(EC 1.4.1.2)广泛分布于植物中,和谷*酸合成酶(GOGAT)共同参与谷*酸的合成,在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用。
GDH催化NH4+、α-酮戊二酸和NADH,生成谷*酸和NAD+,引起340nm吸光度下降。通过测定340nm吸光度的下降速率,计算GDH活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
当ΔA大于0.5时,将样本进行稀释后测量。
由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约1mg/mL),所以在测定样本蛋白浓度时需要减去提取液本身的蛋白含量。
相关发表文献:
Fei Ding,Qiannan Hu,Meiling Wang,et al. Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants. International Journal of Molecular Sciences. December 2018;(IF4.183)
Lin Y, Nan J, Shen J, et al. Canagliflozin impairs blood reperfusion of ischaemic lower limb partially by inhibiting the retention and paracrine function of bone marrow derived mesenchymal stem cells[J]. EBioMedicine, 2020, 52: 102637.
参考文献:
Wen J F, Gong M, Liu Y, et al. Effect of hydrogen peroxide on growth and activity of some enzymes involved in proline metabolism of sweet corn seedlings under copper stress[J]. Scientia horticulturae, 2013, 164: 366-371.
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