食品中亚硝酸盐含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号：BC1490
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

技术指标：
低检出限：0.00061 μmol/mL
线性范围：0.000625-0.1 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
天平、研钵/匀浆器、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
操作步驟：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
称取样本约1g，破碎，加入1mL提取液一，沸水浴15min，冷却至室温，加入1mL提取液二，震荡摇匀，加1mL 提取液三，用镊子加少量提取液四（约2mg），静置30min，10000rpm 离心15min，取上清液待测。
二、测定步骤：

1. 可见分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。

1. 操作表

三、亚硝酸含量计算：

1. 按样本质量计算：

亚硝酸含量（μmol/g 质量）=(A样本-A空白）÷[(A标准-A空白)÷C标准]×V样本÷(W×V样本÷V总)
=0.12×[(A样本-A空白）÷(A标准-A空白)] ÷W

1. 按样本蛋白浓度计算：

亚硝酸含量（μmol/mg prot）=(A样本-A空白）÷[(A标准-A空白)÷C标准]×V样本÷(Cpr×V样本)
                         =0.04×[(A样本-A空白）÷(A标准-A空白)]÷Cpr
V总：加入提取液体积，3mL；V样本：反应中样本体积，0.5mL；C标准：标准溶液浓度，0.04μmol/mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项：

1. 试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。

2. 如果样本吸光值大于1.3，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。

实验实例：

1. 取1g榨菜破碎加入1mL提取液一，之后按提取步骤进行提取，取上清后按照测定步骤操作，测得计算A样本=0.067、A空白=0.001、A标准=0.609，按样本质量计算含量得：

亚硝酸含量（μmol/g 质量）=0.12×[(A样本-A空白）÷(A标准-A空白)]÷W=0.013 μmol/g质量。

1. 取1g火腿破碎加入1mL提取液一，之后按提取步骤进行提取，取上清后按照测定步骤操作，测得计算A样本=0.082、A空白=0.001、A标准=0.609，按样本质量计算含量得：

亚硝酸含量（μmol/g 质量）=0.12×[(A样本-A空白）÷(A标准-A空白)]÷W=0.016 μmol/g质量。 
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