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谷*酰胺酶(GLS)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1450
规格:50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体70 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二A | 液体1 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二B | 液体4 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体5 mL×1瓶 | 常温保存 |
标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
提取液:若试剂有结晶析出,可40℃加热或者超声溶解。试剂一:临用前加入10 mL提取液充分溶解待用;
试剂二B:临用前将试剂二A倒入试剂二B中混匀(A:B=1:4比例),2-8℃保存4周;或者根据样本量,按照体积比试剂二A:试剂二B=1:4现配现用;
标准品:10 μmol/mL氮标准液。
0.3125μmol/mL标准溶液的制备:临用前取25μL 10μmol/mL氮标准液和775μL提取液混合得0.3125μmol/mL的标准溶液备用。
产品说明:
谷*酰胺酶(L-glutamine amidohydrolase,EC3.5.1.2)主要存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷*酰胺水解成谷*和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
本试剂盒利用靛酚蓝比色法测定GLS催化谷*酰胺生成的氨来计算其酶活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、台式离心机、水浴锅、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和双蒸水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
当ΔA大于0.7时,建议将上清液用提取液进一步稀释后测量,计算时乘以稀释倍数。
试剂二配置后尽快使用,若发现变色则不能再用。
相关发表文献:
Fu Y, Lei F, Wang J, et al. Maternal Cigarette Smoke Exposure Disturbs Glutamate/GABA Balance in pFRG of Neonatal Rats[J]. Respiratory Physiology & Neurobiology, 2020: 103383.
Liu S, Li N, Lin Q, et al. Glutaminase 1 in mandarin fish Siniperca chuatsi: Molecular characterization, expression pattern and function involving in virus replication[J]. Aquaculture, 2020: 734924.
参考文献:
Mahajan R V, Saran S, Kameswaran K, et al. Efficient production of L-asparaginase from Bacillus licheniformis with low-glutaminase activity: optimization, scale up and acrylamide degradation studies[J]. Bioresource technology, 2012, 125: 11-16.
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