产品简介
储存条件
2-8℃
中文名称
植物组织果糖含量测试盒 糖代谢
有效期
6个月
单位
盒
英文名称
Plant Tissue Fructose Content Assay Kit
检测方法
可见分光光度法 Spectrophotometer
规格
50T/48S
详细介绍
酰基转移酶（AAT）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。货号：BC2350规格：10T/9S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 液体1.5 mL×1支 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体1mL×1支 | 2-8℃保存 |
提取液：内含不溶物，使用前摇匀；
试剂二：临用前加蒸馏水1mL充分溶解，未用完的试剂2-8℃可以保存2周；
产品说明：AAT是一个多功能蛋白大家族，主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应，在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇，同时还原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，测定412nm吸光度增加速率，来计算AAT活性。注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。4℃，15000 g离心20min，取上清液待测。2、血清（浆）样本：直接检测。（若液体有浑浊则离心后进行测定）二、测定步骤分光光度计预热30min 以上，调节波长至412nm，蒸馏水调零。
试剂一在37℃水浴保温20min以上。
样本测定：
| 试剂名称（μL） | 空白管 | 测定管 |
| 蒸馏水 | 100 | - |
| 上清液 | - | 100 |
| 试剂一（预热） | 700 | 700 |
| 试剂二 | 50 | 50 |
| 试剂三 | 100 | 100 |
| 试剂四 | 50 | 50 |
当吸光值大于1时，建议稀释后测量。
如果ΔA测小于0.01，可以延长反应时间，如测定10s和310s的吸光度，计算时相应修改计算公式中反应时间。
实验实例：取0.1g肾脏加入1mL提取液进行样本处理，取上清后稀释4倍后按测定步骤操作，测得ΔA空=A2空-A1空=0.105-0.101=0.004、ΔA测=A2测-A1测=0.665-0.479=0.186、ΔA=ΔA测-ΔA空=0.186-0.004=0.182，按样本质量计算酶活得：AAT (U/g 质量) =5000×ΔA÷W×4（稀释倍数）=36400 U/g 质量。
取兔血清直接按照测定步骤操作，测得ΔA空=A2空-A1空=0.105-0.101=0.004、ΔA测=A2测-A1测0.622-0.521=0.101、ΔA=ΔA测-ΔA空=0.101-0.004=0.097，按血清体积计算酶活得：AAT (U/mL 血清) =5000×ΔA=5000×0.097=485 U/mL 血清。
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