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商品介绍:
测定原理碱性条件下,蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键,能将Cu2+还原成Cu+;2分子的BCA与Cu+结合,生成紫色络合物,在540-595nm有吸收峰,562nm处吸收峰*。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321371 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
枯草芽孢杆菌1号染色体开放阅读框192抗体Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit人食欲/阿立新B(OX-B)免疫试剂盒
冻干补体1号染色体开放阅读框194抗体Human PDE4D(Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA Kit人生长抑(SS)免疫试剂盒
澳型核果褐腐病菌1号染色体开放阅读框198抗体Human PDIA2(Protein Disulfide Isomerase A2) ELISA Kit人生长激释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)免疫试剂盒
Paenibacillus1号染色体开放阅读框21抗体Human PDIA3(Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit人生长激释放多肽(GHRP)免疫试剂盒
大肠埃希菌1号染色体开放阅读框216抗体Human PCDHβ16(Protocadherin Beta 16) ELISA Kit人生长激结合蛋白(P)免疫试剂盒
大肠埃希菌1号染色体开放阅读框43抗体Human PCDHγA2(Protocadherin Gamma A2) ELISA Kit人生长激(GH)免疫试剂盒
大肠埃希菌1号染色体开放阅读框50抗体Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit人生长分化因子-9(GDF-9)免疫试剂盒
黄硬皮马勃1号染色体开放阅读框49抗体Human PCI(Protein C Inhibitor) ELISA Kit人生长分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)免疫试剂盒
柱孢绿僵菌1号染色体开放阅读框53抗体Human PCIII(Procollagen III) ELISA Kit人生长分化因子2(GDF2)免疫试剂盒
丽胡枝子根瘤菌1号染色体开放阅读框54抗体Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit人生长分化因子15(GDF15)免疫试剂盒
棉阿舒囊霉1号染色体开放阅读框55抗体Human PDI(Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit人生长调节致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)免疫试剂盒
绿色木霉1号染色体开放阅读框56抗体Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit人肾小球组织糖基化终末产物(GTE-AGE)免疫试剂盒
大肠埃希菌1号染色体开放阅读框65抗体Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit人肾损伤分子1(Kim-1)免疫试剂盒
酿酒酵母1号染色体开放阅读框64抗体Human ON(Osteonectin) ELISA Kit人肾前体免疫试剂盒
弓形虫(GTS-2株)1号染色体开放阅读框69抗体Human OTR(Oxytocin Receptor) ELISA Kit人肾(Renin)免疫试剂盒
灰树花-41号染色体开放阅读框77抗体Human NRG-2(Neuregulin 2) ELISA Kit人肾上腺髓质前体(Pro-ADM)免疫试剂盒
曲霉属Aspergillus│sp. 质量规格:>98%,BCCD209分子试剂盒γ-倒捻子
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,BCCD19分子试剂盒扁豆碱
: NRRLB-24209=JCM12669=DSM44594资源名称: Amycolatopsisdecaplanina 质量规格:>98%,BRCD15分子试剂盒冬凌草乙
BCA蛋白法含量测试盒50管/48样山茶 马尿酸钠肌球蛋白轻链激Elisa
大肠埃希 5-己炔酸色羟化2Elisa
盘多毛孢属 2,4,6-三苯肼胰岛样生长因子Elisa
食砜节杆 柯衣定蛋白ZElisa
松生茎点霉 Boc-4-甲氧基-L-苯CXC趋化因子配体12Elisa
烟管 4--3-硝苯抗凝血Elisa
大肠埃希氏 H-Sar-NH2·HCl5羟色2BElisa
果生链核盘 1,2-乙烷基二磺酸钠Artemin蛋白Elisa
大肠埃希氏(大肠杆) 银硬脂酰去饱和Elisa
弗氏假丝酵母 2,2'-二萘细小病抗体Elisa
耶特链霉 N-[(基硅)甲基]苄麻疹病Elisa
根瘤属 1-(3-)哌瘟热病Elisa
糖化酵母 3,3'-二基硫杂二羰花青化物父系表达基因2Elisa
类干酪乳杆 二(三-t-丁基膦)钯(0)游离氨基酸Elisa
扶桑本森顿酵母 6-氨基富含半胱型酸性蛋白Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。