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试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍：
测定意义： 丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢，起着重要的枢纽作用。 测定原理： 丙酮酸与2,4-二硝ji苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝ji苯腙，在碱性溶液中呈显色。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。 |
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS6321150 |
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
茶黄-3'-没食子酯英文名： Potassium pyrophosphate, tetrabasic叉头蛋白G1抗体包装250mg
茶黄-3-没食子酯英文名： Potassium tungstate, dehydrate肿瘤/抗原112抗体包装100ml
(标准品)英文名： Quinine hemisulfate salt hydrate微管动力调节蛋白FAM82A抗体包装25ml
柴胡（北柴胡）（标准品）英文名： Sodium phosphate, dibasic, dodecahydrateFAM50B蛋白抗体包装500ml
柴胡皂苷A(标准品)英文名： Sodium phosphotungstate, hydrate形成2抗体（成蛋白）包装100g
柴胡皂苷B1（标准品）英文名： Sodium stearate脂阀结构蛋白1抗体包装25g
柴胡皂苷B2（标准品）英文名： Sodium thiosulfate anhydrous成纤维生长因子17抗体包装1g
柴胡皂苷B3(标准品)英文名： Sulfo NHS LC Biotin成纤维生长因子23抗体包装5g
柴胡皂苷B4英文名： Sulfo NHS SS Biotin成纤维生长因子20抗体包装1g
柴胡皂苷C（标准品）英文名： Tetraacetylribose成纤维生长因子19抗体包装5g
柴胡皂苷D(标准品)英文名： Tyrosine decarboxylase成纤维生长因子22抗体包装25g
柴胡皂苷F(标准品)英文名： Victoria blue R胎球蛋白A包装5g
柴胡皂苷G(标准品)英文名： α-Ketoglutaric acid potassium salt叉头蛋白L2抗体包装25g
柴胡皂苷H(标准品)英文名： 1,1-Cyclohexanediacetic acid monoamide叉头相关转录因子3抗体包装5g
柴胡皂苷I英文名： 1,2-Ethanedithiol铁蛋白抗体包装1g
深黄被孢霉Mortierella│isabellina 质量规格：≥60U/mg,USP,BR，可用于培养生长激释放多肽试剂盒7-羟基千金子二萜;7β-Hydrox
苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis Berliner 质量规格：>98%,BR生长激结合蛋白试剂盒芹糖异甘草苷;Isoliquiritin
华癸中间根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 质量规格：含量测定生长激试剂盒5-羟色;Serotonin hydr
丙酮酸（PA)含量测试盒100管/96样木樨草青霉 2-溴-3-氟-4-胰岛样生长因子结合蛋白5Elisa
果生链核盘 乙缩乙二Elisa
虫花棒束孢 2-乙基-3-甲氧基吡CD39分子Elisa
大豆慢生根瘤 2-萘酸频哪酯聚(ADP核糖)聚合1Elisa
白色念珠-质控 6-硝基喹喔啉-2-酮S100-β蛋白Elisa
罗氏链霉 丁基萘磺酸钠磷酸化TAR DNA结合蛋白43Elisa
Bacillus anthracis 六溴环十二烷多配体蛋白聚糖1Elisa
枯草芽孢杆 4,4,4-三氟巴豆酸乙酯酪激1Elisa
短杆属 甲基六氢苯酐Toll样受体5Elisa
球孢白僵 L-天冬酰叔丁酯鞭毛蛋白Elisa
淡天蓝链霉 1-Boc-3-氮杂环丁烷酮酸激Elisa
异常毕赤酵母 2--3-溴-5-氟吡啶CD247分子Elisa
大豆慢生根瘤 N-甲基正戊血小板P2Y12受体Elisa
溶杆 2,4-二甲基-5-基-1H-吡咯-3-羧酸b型链球抗m蛋白抗体Elisa
龟裂链霉 2-己基癸酸糖原合成激3Elisa
