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上海市所在地
公司产品仅供科研使用:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
微量法 | 100管/96样 | AS6321147 |
商品介绍:
商品介绍 测定意义: CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。 配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。 测定原理: CA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。 自备仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。 |
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
产品优点如下:
1、快速简便:双试剂,直接操作,快速、简便。
2、取样量微:需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高:检测线0.5U/ml,是羟胺法5倍,邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好:批内CV=5.50%,批间CV=3.32%,试剂盒2~8℃存放3个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.2%。6、回收试验: X =102.3%。7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。且特异性强,不受类SOD物质的干扰8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
白头翁皂苷E英文名: Nickel (II) fluoride tetrahydrate上皮膜蛋白3抗体包装5g
白头翁皂苷E-1英文名: Silicon (IV) oxide膜蛋白EVC2抗体包装1g
白头翁皂苷E-2英文名: Strontium fluoride哺乳动物室管膜相关蛋白1抗体包装5g
白头翁皂苷E-3英文名: Syringaldehyde内皮粘附分子抗体包装10g
白土苓(短柱肖菝契)(标准品)英文名: Tetrazolium violet上皮有丝分裂蛋白抗体包装50g
白土苓(华南肖菝葜)(标准品)英文名: 2-MethylindoleEmerin蛋白抗体包装25g
白薇(标准品)英文名: Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate外信号调节激5抗体包装5g
白鲜碱(标准品)英文名: AMP buffer concentrate磷/磷二酯家族成员5抗体包装1g
白鲜皮(标准品)英文名: Benzimidazole早期生长反应蛋白2抗体包装25g
白杨(标准品)英文名: Carboxypeptidase B磷化雌激受体β抗体包装5g
白杨-7-O-龙胆二糖苷英文名: Cobalt (II) carbonate, hydrate乙激β抗体包装1g
白英(标准品)英文名: dTDP微管相关末端结合蛋白2抗体包装5g
白芷(标准品)英文名: Galactose oxidase减数分裂内切EME1抗体包装1g
百部(对叶百部)(标准品)英文名: Iron (II) oxalate, dihydrate延伸突触蛋白2抗体包装25g
百部(直立百部)(标准品)英文名: Lead (II) chloride延伸突触蛋白1抗体包装5g
40044=ATCC23908=CBS804.68=IFO12862=ISP资源名称: 脆弱链霉菌 质量规格:>98%,BR通道蛋白4抗体试剂盒;Ginsenoside
出芽短梗霉Aureobasidium│pullulans 质量规格:HPLC≥98%,标准品通道蛋白3试剂盒人参皂苷RD;Ginsenoside R
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,BR痘带状疱疹病IgM试剂盒人参皂苷RC;Ginsenoside R
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒100管/96样弗雷德里克斯堡假单胞 3--2-吡甲酸甲酯蛋白聚糖Elisa
小奥德蘑 1,3-双(2-异基-2-基)苯碱性成纤维生长因子抗体Elisa
三骨菇 反式-4-(叔丁氧羰基氨基)环己基羧酸甘油二酯Elisa
桔青霉 4-氮杂-3-甲过氧化物体Elisa
喜寒犁头霉 2-甲基丁酸-3-甲基丁酯核内蛋白Elisa
胡椒枯萎病 富马酸单甲酯结核杆抗原Elisa
短小芽孢杆 DL-二硫苏糖铜锌过氧化物岐化Elisa
笔状地霉 2-甲基吗啉趋化因子C-C-基元受体6Elisa
大肠埃希 亮叔丁酯盐酸盐磷酸化肝生长因子受体Elisa
链霉 咪唑并[1,2-a]吡啶分泌型碱性磷酸Elisa
大肠埃希氏 N-甲基-4-溴苯甲酰Smads2Elisa
黄芪叶杆 3-溴-4-氟Smads7Elisa
红缘拟层孔 苯并恶唑糖蛋白AElisa
运动张树政氏 乳糖酸钠白蛋白抗体Elisa
奇异变形杆49005 盐酸左电压依赖性阴离子通道蛋白1Elisa
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。