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商品介绍:
商品介绍 测定意义: CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。 配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。 测定原理: CA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。 自备仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵和蒸馏水。 |
公司产品仅供科研使用:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
紫外分光光度法 | 25管/24样 | AS6321147 |
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
产品优点如下:
1、快速简便:双试剂,直接操作,快速、简便。
2、取样量微:需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高:检测线0.5U/ml,是羟胺法5倍,邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好:批内CV=5.50%,批间CV=3.32%,试剂盒2~8℃存放3个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.2%。6、回收试验: X =102.3%。7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。且特异性强,不受类SOD物质的干扰8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
宝藿苷V英文名: Barium carbonate内皮-1抗体包装25ml
宝藿苷VII英文名: Benzamide丝裂原活化蛋白激4抗体包装5ml
杯苋甾(标准品)英文名: Biebrich scarlet埃兹蛋白抗体包装1g
北苍术(标准品)英文名: Calcium citrate, tetrahydrate转录因子ELK1抗体包装100g
北豆根(标准品)英文名: Cesium sulfate内皮-1单克抗体包装25g
北芹英文名: Copper sheet肠道病71型抗体包装5g
北芹(标准品)英文名: Copper(I) chloride抗志贺大肠杆菌O139抗体(仔猪肿病志贺大肠杆菌O139)包装25g
北五加皮苷M;杠柳苷M英文名: Copper (I) iodide表皮生长因子抗体包装5g
北五加皮苷N;杠柳苷N英文名: dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate disodium salt表皮生长因子抗体包装1g
贝萼皂苷元英文名: D-Glucuronic acid, sodium salt, monohydrate磷化真核翻译延长因子2抗体包装250mg
贝萼皂苷元-3- O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: Ficol 70真核延伸因子激2抗体包装1g
贝母花(标准品)英文名: Guanidine carbonate磷化真核延伸因子激2抗体包装1g
贝母(标准品)英文名: Hydrazine hydrochloride真核启动因子2α抗体(eIFα2)包装1g
贝母乙(标准品)英文名: Iron(III) sulfate, hydrate磷化一氧化氮合成3(内皮型)抗体包装250mg
贝母辛(标准品)英文名: Methyl gallate真核翻译延长因子2抗体包装5g
拟囊体侧耳Pleurotus│cystidiosus 质量规格:HPLC≥99%,标准品输血传播病/辛型肝炎病抗原鞣花;Ellagic acid
土曲霉Aspergillus│terreus Thom 质量规格:>99%,BR输血传播病试剂盒肉桂;Cinnamic acid
ATCC15835资源名称: 棘孢小单孢菌 质量规格:HPLC>98%,标准品输卵管特异性糖蛋白试剂盒染料木苷;Genistin
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒25管/24样红根须腹 4-羟基喹啉-3-甲酸乙酯胱Elisa
南类芽孢杆 肉桂基透明质酸结合蛋白2Elisa
芽孢杆 5-(二乙氨基)戊基乙巨噬来源的趋化因子Elisa
米串珠镰孢 N,N-二甲基烯酰单核趋化蛋白4Elisa
灰平链霉 (R)-(+)-α-[(3-甲氧基-1-甲基-3-氧代-1-烯基)氨基]-1,4-环己二烯-1-乙马尿酸Elisa
需钠弧 D-(-)-2-(2,5-二氢苯基)甘Smad同源物1Elisa
油菜核病 抗氧化剂THP-24Smad同源物3Elisa
枯草芽孢杆 5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-硝基吡啶Smad同源物7Elisa
围小丛壳 (R)-2-氨基-3-(2-溴苯基)酸裂殖子表面蛋白1Elisa
平菇—法无孢 异氟血管紧张Elisa
枯草芽孢杆 2-溴-4-甲苯甲状腺球蛋白Elisa
香菇 苯并咪唑-5-甲酸甲酯鼠李糖苷Elisa
澳型核果褐腐病 N4-苯甲酰基胞嘧啶鼠李糖苷Elisa
柠檬色小单孢 6-氟-2-甲基Ⅲ型前胶原氨基端肽Elisa
Sphingobacterium composti 尼泊金十二酯软骨间层蛋白2Elisa