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上海市所在地
商品介绍:
测定意义: MCS广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,与柠檬酸合酶(CS)共同参与三羧酸循环的调节。 测定原理: MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸产生甲基柠檬酰fu酶A,进一步水解产生甲基柠檬酸;该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在 412nm处有特征吸光值。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321151 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
赤胫散(标准品)英文名: 2-Hydroxyacetophenone范可尼贫血组蛋白A抗体包装25g
赤芍(川赤芍)(标准品)英文名: 2-Isopropylimidazole卷曲蛋白3抗体包装5g
赤芍(标准品)英文名: 2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid分裂周期样蛋白20抗体包装100g
虫草(标准品)英文名: 2-Naphthaldehyde铁氧化还原蛋白还原抗体包装25g
臭灵丹(标准品)英文名: 2-Naphthyl acetate磷化碱性成纤维生长因子受体1抗体包装5g
臭梧桐叶(标准品)英文名: 3,4,5-Trimethoxycinnamic acid精结合蛋白17抗体包装25g
川贝母(标准品)英文名: 3,4-Dimethoxybenzaldehyde泛样核糖体蛋白S30/MNSF-β抗体包装5g
川陈皮(标准品)英文名: 3-HydroxybenzaldehydeF-box蛋白2抗体包装100g
川灯心草(标准品)英文名: 3-Hydroxycinnamic acidF-box蛋白45抗体包装500g
川楝(标准品)英文名: 4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone法尼基二磷合抗体包装1g
川楝子(标准品)英文名: 4,5-DichlorofluoresceinIgG-Fc片断受体转运蛋白α抗体包装25g
川麦冬苷A英文名: 4-Ethoxybenzaldehyde酰基合成4抗体包装5g
川木通(标准品)英文名: 4-Hydroxycoumarin补体因子D抗体包装25g
川木香(标准品)英文名: 4-Methoxyphenol补体因子I轻链抗体包装5g
川牛膝(标准品)英文名: 4-Methylcinnamic acidFAHD1蛋白抗体包装10g
多粘类芽孢杆菌Paenibacillus│polymyxa 质量规格:HPLC>97%,BR肾损伤分子1试剂盒去亚基小檗碱;Demethyleneb
AS2.181资源名称: 鲁氏接合酵母 质量规格:>98%,BR肾前体3,5,6,7,8,3’,4’-七氧基
: B739资源名称: 谷棒杆菌 质量规格:HPLC>98%,标准品肾试剂盒25-羟基原人参二;25-OH-PPD
甲基柠檬酸合酶(MCS)测试盒50管/48样类高加索酸奶乳杆 巯基苯并噻唑钠结核杆IGM抗体Elisa
糙皮侧耳 3-环戊基-3-氧代酸乙酯分泌型Klotho蛋白Elisa
慢生海杆状* 4-[(4-氨基苯基)偶氮]苯磺酸单钠盐纤维结合蛋白Elisa
卷枝毛霉詹森变型 (S)-2,6-二叔丁氧羰基氨基己酸可溶性E钙粘着蛋白;可溶性上皮性钙黏附蛋白Elisa
黄赭色链霉 3-氟-2-甲苯膜联蛋白-A2IgG抗体Elisa
阪崎肠杆 2-甲基丁酸苯乙酯膜联蛋白-A2IgM抗体Elisa
罗尔斯通氏 3-氨基-4-甲氧基甲酯膜联蛋白-A5IgG抗体Elisa
酿酒酵母 4-羟基丁基烯酸酯膜联蛋白-A5IgM抗体Elisa
巴斯德毕赤酵母 5-溴-2-甲氧基糖基化终末产物Elisa
粪产碱 克林霉磷酸酯酪酪肽3-36Elisa
汉逊德巴酵母 2,3-二氟-4-溴苯丁PIM1激Elisa
酿酒酵母 2-溴-4,5-二氟长链酰基脱氢Elisa
无色杆 基酮长链酰基脱氢Elisa
青蓝链霉 2-异丁基-3-甲氧基吡多氧化Elisa
假坚强芽孢杆 2,3-二羟基苯甲抗流行性出血热病IgM抗体Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。