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生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321115 |
商品介绍:
测定意义 半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱),十字花科芸薹属 (如卷心菜,菜花,西兰花),以及豆科中的合金欢属中,并通常被称为蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨酸亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精,以及产生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是内源性甲醛生成的关键酶之一,测定CSL活性对于研究食品安全具有重要意义。 测定原理 CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生丙酮酸,与2,4-二硝ji苯肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm下有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
化琥珀酰(标准品)英文名: Amidopyrine/aminopyrine1号染色体开放阅读框229抗体包装1g
化(标准品)英文名: Angiotensin II杀菌肽/天蚕抗菌肽抗体包装25g
(标准品)英文名: Vitamin D3Cullin 4a蛋白抗体包装5g
化乙酰(标准品)英文名: Pazopanib HCl角蛋白3抗体包装250mg
解磷定(标准品)英文名: Tiotropium bromide anhydrous 5号染色体开放阅读框52抗体包装10mg
雷他定(标准品)英文名: Formoterol fumarate 卷曲螺旋结构域蛋白85B抗体包装50mg
霉(标准品)英文名: Formoterol fumarate 紧密连接蛋白14抗体包装1g
霉二物(标准品)英文名: Faropenem sodium人巨病单克抗体包装100g
扎(标准品)英文名: Faropenem sodium癌胚抗原抗体包装25g
诺昔康(标准品)英文名: Orlistat(synthesis)表面趋化因子受体3抗体包装500g
普噻吨(标准品)英文名: Rifamycin sodium salt1号染色体开放阅读框33抗体包装1g
羟吡啶;吡多(标准品)英文名: Octreotide acetate磷化转录调节因子CEBP α 抗体包装5g
屈膦二钠(标准品)英文名: (S)-(+)-2-Amino-1-butanol 磷化转录调节因子CEBP β抗体包装100ml
噻(标准品)英文名: trans-D-erythro-sphingosine磷化转录调节因子CEBP β抗体包装25ml
噻(标准品)英文名: ribophytosphingosine hydrochloride磷化整合β2/Integrin β2抗体包装1g
40595=ATCC15722,CBS785.72,IMRU3751,ISP5595,JCM3045,JCM4805,RIA1445资源名称: 橄榄色菌核链霉菌 质量规格:>98,BR外基质磷糖蛋白试剂盒褪黑;Melatonine
苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格:>98%,BR色P450c21B/21-羟化试剂盒通关藤苷H;Tenacissoside
AS2.1182资源名称: 克鲁斯假丝酵母 质量规格:HPLC>98%,标准品色P450c21A/21-羟化试剂盒脱内酯琥珀半酯;Dehydro
半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)测试盒50管/24样绿色木霉 苯硫基乙酸胃癌抗原MG7Elisa
扩展青霉 3-(2-吡啶基氨基)酸乙酯IElisa
姬菇 1-苯基氨基脲IIIElisa
2--3-氟IVElisa
卫矛 3-(4-溴苯基)-9-苯基-9H-咔唑VElisa
枯草芽孢杆 2-甲氧基-3-溴-5-吡啶ⅦElisa
黄海鞘氨盒 氧化异佛尔酮ⅧElisa
香菇 3-甲基-2-苯基吡啶ⅨElisa
伯顿丝孢毕赤酵母 L-3-环基ⅪElisa
巴斯德毕赤酵母 3--5-甲氧基苯XIIElisa
费氏中华根瘤 3-溴苄ⅡElisa
澳型核果褐腐病 Fmoc-L-苯甘2,3-双加氧1Elisa
鞘氨单胞 N,N'-二苄基-1,3-二钙结合蛋白B1Elisa
银杏盘多毛孢 2,3-二磷脂A2Elisa
pESC-Ura 4'-甲氧基-2-苯基苯乙酮elabelaElisa