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生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321125 |
商品介绍:
测定意义哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。测定原理CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,通过测定萘酯的生成速率即可计算出CarE的活性。实验中所需仪器及设备可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水和无水乙醇。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
头孢匹林钠(标准品)英文名: GeniposideDYX1C1蛋白抗体包装5g
头孢羟苄 (标准品)英文名: GeniposideE3泛蛋白连接dzip3抗体包装1g
头孢曲松钠(标准品)英文名: 17-Methyltestosterone三磷腺苷依赖解旋DDX23抗体包装250mg
头孢噻吩(标准品)英文名: Tetrahydro-L-Biopterin free base多能发育相关基因5抗体包装5g
头孢噻呋钠(标准品)英文名: Tirofiban HCl三磷腺苷依赖解旋DDX3抗体包装100mg
头孢噻肟钠(标准品)英文名: Tirofiban HCl磷化三磷腺苷依赖解旋DDX3抗体包装1g
头孢妥仑匹酯(标准品)英文名: Pullulan迪格弗-梅尔基奥尔-克劳森综合征相关蛋白抗体包装500mg
头孢西丁钠(标准品)英文名: Vitamin E,dl-α-tocopherol双氧化激活因子2抗体包装5g
头孢西丁(头孢西丁)(标准品)英文名: StavudineRNA结合泛连接DZIP3抗体包装100mg
头孢唑啉(标准品)英文名: Stavudine二氢二脱氢1/2抗体包装500mg
头孢唑啉钠(标准品)英文名: Moclobemide形态发生紊乱关联激活因子2抗体包装1g
头孢唑肟(标准品)英文名: Moclobemide质分裂付出蛋白2抗体包装5g
头孢唑肟钠(标准品)英文名: Astragaloside IV质分裂付出蛋白4抗体包装1g
土霉A(标准品)英文名: Astragaloside IV质分裂付出蛋白5抗体包装250mg
褪黑,松果体(标准品)英文名: Nateglinide淋巴抗原75抗体包装50ml
: D8(1957)资源名称: 伤寒沙门氏菌 质量规格:>99%,BR维生D2试剂盒四氢小檗碱;Tetrahydroberb
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:HPLC>98%,标准品维生C试剂盒苏木;Hematoxylin
胶孢刺盘孢Colletotrichum│gloeosporioides 质量规格:>98.5%,USP,可用于培养维生B6试剂盒双醋瑞因;1,8-Diacetoxy-3
羧酸酯酶(CarE)测试盒50管/48样猪丹丝 3-苯酮状瘤病16型Elisa
卵孢木霉 异丁酸肉桂酯状瘤病18型Elisa
蜡状芽孢杆 丁酸苯乙酯铁过氧化物岐化Elisa
聚生壳 2-氨基嘧啶-5-酸前血小板碱性蛋白Elisa
伊平屋桥大洋芽孢杆 3-叔丁基己二酸泛蛋白连接E3成分N-识别蛋白1Elisa
顶青霉 邻甲基肉桂肝生长因子受体Elisa
耐久肠球 4'-溴苯酮拓扑异构ⅡElisa
豇豆慢生根瘤 丁酸苄酯抗新喋呤抗体Elisa
硫磺 2-甲基-3-吡咯甲酸乙酯硫酸角质Elisa
根瘤 异丁酸苯甲酯亲核α2Elisa
Leminorella richardii 2-溴-4-DNAⅠ样蛋白3Elisa
硝孢链霉 4-甲砜基苯乙酮Sorbin和含SH3结构域的蛋白2Elisa
色串孢属 高酸铜(II)六水合物增殖诱导配体Elisa
噬尼古丁节杆 水杨酰肼肽抑制剂16Elisa
直立枝孢 左乙西坦抑癌基因Beclin1Elisa