其他品牌 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321107 |
商品介绍:
测定意义: LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,广泛存在于肝、肾、胰等组织中,尤其以肝脏中含量最为丰富。各类肝病患者因肝细胞损伤,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的检测能从不同侧面反映各种肝病的发生和发展。 测定原理: LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。 自备用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
脲(标准品)英文名: Tiotropium bromide hydrate 6号染色体开放阅读框222抗体包装1g
脲杂质2(标准品)英文名: Amiodarone HCl热休克蛋白58抗体包装1g
脲杂质Ⅰ/4-[2-(3-乙基-4-基-2-氧...英文名: Amiodarone HCl色C P450 17A1抗体包装100g
齐特(标准品)英文名: Amotriptan malate膜蛋白CLDND1抗体包装25g
齐特杂质Ⅰ/1-(3-氮杂双环[3.3.0]辛基)...英文名: Vidarabine/Ara-A二氢嘧啶相关蛋白1抗体包装5g
(标准品)英文名: Vidarabine/Ara-A霉单克抗体包装100ml
(标准品)英文名: Ampicillin TrihydrateCD98重链抗原抗体包装25ml
庚炔诺(标准品)英文名: Ampicillin Trihydrate钙蛋白抑制蛋白抗体包装500ml
枸橼铋(标准品)英文名: Atipamezole HClcGMP依赖性蛋白激1抗体包装1g
枸橼己定(标准品)英文名: Atipamezole HCl胞浆钙独立磷脂A2抗体包装100g
枸橼莫沙比(标准品)英文名: Azatadine Maleate1号染色体开放阅读框98抗体包装500g
枸橼喷妥维林(标准品)英文名: Bambuterol HClCOX4NB蛋白抗体包装1g
枸橼E-异构体英文名: Bambuterol HCl肿瘤/抗原77抗体包装5g
枸橼锌(标准品)英文名: Benserazide HClCD81抗体包装1g
枸櫞奧芬那君;枸芬那君(标准品)英文名: Canagliflozin辅Q10B抗体包装100g
蠕形青霉Penicillium│vermiculatum 质量规格:HPLC>98%,标准品锌指蛋白644试剂盒维生B2;Vitamin B2
芽孢杆菌Bacillus│sp. 质量规格:>98%,富马盐,BR锌α2糖蛋白试剂盒维生E;Vitamin E
#白色短杆菌Curtobacterium│albidum (Komagata and Iizuka) Yamada and Komagata 质量规格:≥98%,标准品心型脂肪结合蛋白试剂盒维生C;Vitamin C
亮氨酸氨基肽酶(LAP)测试盒50管/48样普通变形杆 3-基苯酸频哪酯盘状结构域受体家族成员1Elisa
橙鳞伞2 正戊基三苯基溴化磷血管内皮生长因子受体1Elisa
北里胞 5-溴-3--2-甲酸甲酯血管内皮生长因子受体4Elisa
羊无浆体(青海海宴株) (三苯基亚正膦基)乙视黄Elisa
鲍姆针层孔 (S)-(-)-2-羧基环丁鳞状癌相关抗原2Elisa
枯草芽孢杆 2--6-甲酸神经营养受体P75Elisa
鼠李糖乳杆 3-溴苯基硫脲低氧诱导因子1Elisa
棘孢曲霉 4,6-二-5-氟嘧啶精浆弹性硬蛋白Elisa
酿酒酵母 1-苄基-2-羧酸精浆弹性硬蛋白Elisa
类阿达青霉 4-异硫酸苯酯糖类抗原15-3Elisa
带小棒链霉 2-(3,4-二苄基)苯并咪唑半乳糖苷Elisa
都柏林克罗诺杆都柏林亚种 2,3-二溴-1,4-二半胱氨酰白三烯Elisa
球孢白僵 3-溴-5-氟苯乙DDX4Elisa
Sphingomonas abaci 1-萘乙酸乙酯基膜聚糖;内腔蛋白Elisa
大肠埃希 3-羟基己酸甲酯前肾Elisa