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商品介绍:
测定意义 木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。 测定原理 木质素过氧化物酶催化天青脱甲基,在651nm处测定吸光值减少。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321360 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
酿酒酵母卷曲螺旋结构域蛋白40抗体Human Acetylated HB(Acetylated Hemoglobin) ELISA Kit人血红蛋白C(HbC)免疫试剂盒
白色短波单胞菌卷曲螺旋结构域蛋白114抗体Human ProSAAS/PCSK1N(granin-like neuroendocrine peptide) ELISA Kit人血红蛋白(Hb)免疫试剂盒
挪威毕赤酵母卷曲螺旋结构域蛋白39抗体Human GGH(Gamma-glutamyl hydrolase) ELISA Kit人血管抑/血管稳定蛋白(ANG)免疫试剂盒
华根霉卷曲螺旋结构域蛋白34抗体Human P2RY2(P2Y purinoceptor 2) ELISA Kit人血管性血友病因子裂解(ADAMTS-13/vWF-cp)免疫试剂盒
黄曲霉卷曲螺旋结构域蛋白75抗体Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) ELISA Kit人血管舒缓激肽(BK)免疫试剂盒
香菇卷曲螺旋结构域蛋白65抗体Human OT(Oxytocin) ELISA Kit人血管生成抑制因子(Arresten)免疫试剂盒
酿酒酵母卷曲螺旋结构域蛋白157抗体Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) ELISA Kit人血管生成样蛋白4(ANGPTL4)免疫试剂盒
松针散斑壳卷曲螺旋结构域蛋白90B抗体Human TXB2(Thromboxane B2) ELISA Kit人血管生成样蛋白3(ANGPTL3)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌卷曲螺旋结构域蛋白144A抗体Human KYN(Kynurenine) ELISA Kit人血管生成4(ANG-4)免疫试剂盒
深红酵母卷曲螺旋结构域蛋白104抗体Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) ELISA Kit人血管生成2(ANG-2)免疫试剂盒
微白类诺氏菌卷曲螺旋结构域蛋白12抗体Human TXB2(Thromboxane B2) ELISA Kit人血管生成1(ANG-1)免疫试剂盒
凯斯特鞘单胞菌卷曲螺旋结构域蛋白67抗体Human OT(Oxytocin) ELISA Kit人血管生长(ANG)免疫试剂盒
尖角凸脐蠕孢卷曲螺旋结构域蛋白129抗体Human KYN(Kynurenine) ELISA Kit人血管内皮抑抗体(ES-Ab)免疫试剂盒
蔷薇生链格孢卷曲螺旋结构域蛋白107抗体Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) ELISA Kit人血管内皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫试剂盒
假单胞菌属卷曲螺旋结构域蛋白18抗体Human Acetylated p53(Acetylated p53) ELISA Kit人血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3/Flt-4)免疫试剂盒
Microterricola viridarii卷曲螺旋结构域蛋白56抗体Human Cleaved CASP9(Cleaved Caspase-9) ELISA Kit人血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)免疫试剂盒
猴头菌(猴头蘑、刺猬菌)Hericium│erinaceus 质量规格:>98%,BRE钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白试剂盒槲皮-3-O-β-D-葡糖糖-7-O-
: 195-75资源名称: O1群霍乱弧菌 质量规格:>99%,BRES1蛋白同系物,线粒体试剂盒胡薄荷
解脂假丝酵母Candida│lipolytica 质量规格:>98%,BREphrin-B2试剂盒红花八角
木质素过氧化物酶(LiP)测试盒50管/48样Prauserella L-3-(2-萘基)-血管生成2Elisa
蜡状芽孢杆 碳酸铷血管生成受体酪激1Elisa
贝伦格葡萄座腔梨生专化型 2,3-二甲吡啶血管生成受体酪激2Elisa
少根根霉 4,4'-双(N-咔唑)-1,1'-联苯血管生成样蛋白2Elisa
钦海特德沃斯氏 双[2-(2-苯并噻唑基)]锌血管生成样蛋白3Elisa
谷棒杆 2-羟基苯乙酮血管性血友病因子Elisa
包围漆斑 3,3,5-三-L-甲状腺原血管抑;血管稳定蛋白Elisa
巨大球属 N-乙酰-DL-谷血红蛋白Elisa
康氏假单胞 3-羟基-4-血红蛋白晚期糖基化终末产物Elisa
硬水黄杆 2-(2-氨基苯基)-1H-苯并咪唑血红氧合1Elisa
不动杆 4-溴-4',4''-二甲基三苯血红氧合2Elisa
动物双歧杆乳亚种 7-羟基喹啉血Elisa
黄硬皮马勃 3-羟基喹啉血浆α颗粒膜蛋白Elisa
猪布鲁氏 6-羟基喹啉血浆前激肽释放Elisa
固氮 寡霉A血钠Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。