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产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒100管/48样 | 微量法 | 100管/48样 | AS63211 |
商品介绍:
商品介绍 测定意义 辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。 测定原理 分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
产品优点如下:
1、快速简便:双试剂,直接操作,快速、简便。
2、取样量微:需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高:检测线0.5U/ml,是羟胺法5倍,邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好:批内CV=5.50%,批间CV=3.32%,试剂盒2~8℃存放3个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.2%。6、回收试验: X =102.3%。7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。且特异性强,不受类SOD物质的干扰8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
乳酸脱氢酶(LDH)测试盒100管/48样 辅酶Ⅰ系列
乳酸脱氢酶(LDH)测试盒50管/24样 辅酶Ⅰ系列
NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
线粒体呼吸链复合体Ⅰ/NADH辅酶Q还原酶测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
线粒体呼吸链复合体Ⅰ/NADH辅酶Q还原酶测试盒25管/24样 辅酶Ⅰ系列
NADH氧化酶(NOX)测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
NADH氧化酶(NOX)测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
柠檬酸合酶(CS)测试盒100管/48样 辅酶Ⅰ系列
柠檬酸合酶(CS)测试盒50管/24样 辅酶Ⅰ系列
柠檬酸合酶(CS)测试盒25管/12样 辅酶Ⅰ系列
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
乙醇含量测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
乙醇含量测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
乙醇脱氢酶(ADH)测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
乙醇脱氢酶(ADH)测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
甲醛脱氢酶(FDH)测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
甲醛脱氢酶(FDH)测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒100管/96样 辅酶Ⅰ系列
乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒50管/48样 辅酶Ⅰ系列
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒100管/48样 辅酶Ⅱ系列
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒50管/24样 辅酶Ⅱ系列
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒100管/48样 辅酶Ⅱ系列
Rat Ficolin-2酶联免疫试剂盒 Rat Ficolin-2 ELISA Kit
Ractopamine酶联免疫试剂盒 Ractopamine ELISA Kit
Quinolones酶联免疫试剂盒 Quinolones ELISA Kit
Pig Ficolin-2酶联免疫试剂盒 Pig Ficolin-2 ELISA Kit
Phenylbutazone酶联免疫试剂盒 Phenylbutazone ELISA Kit
Mouse Ficolin-2酶联免疫试剂盒 Mouse Ficolin-2 ELISA Kit
Human Heat shock protein beta-6酶联免疫试剂盒 Human Heat shock protein beta-6 ELISA Kit
Human cleaved microtubule-associated protein tau酶联免疫试剂盒 Human cleaved microtubule-associated protein tau ELISA Kit
Corticosteroid酶联免疫试剂盒 Corticosteroid ELISA Kit
Clenbuterol酶联免疫试剂盒 Clenbuterol ELISA Kit
Chloramphenicol酶联免疫试剂盒 Chloramphenicol ELISA Kit
Bovine Ficolin-2酶联免疫试剂盒 Bovine Ficolin-2 ELISA Kit
Boldenone酶联免疫试剂盒 Boldenone ELISA Kit
Beta Lactams酶联免疫试剂盒 Beta Lactams ELISA Kit
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒100管/48样Beta Agonists酶联免疫试剂盒 Beta Agonists ELISA Kit
19-Nortestosterone酶联免疫试剂盒 19-Nortestosterone ELISA Kit
斑马鱼胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)ELISA试剂盒
斑马鱼胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)ELISA检测试剂盒
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。