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试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。测定原理利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。需自备的仪器和用品可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321285 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
马来阿扎他啶英文名: LHRH (4-10)磷变位1抗体包装1g
马来尼敏英文名: Lymphocyte Activating Pentapeptide磷激1抗体包装5g
马来吡英文名: Melittin(Mellitin)羧化抗体包装1g
马来伏沙明英文名: Metamorphosin A脱氢复合物X蛋白抗体包装5g
马来那敏/扑尔敏英文名: Neo-Kyotorphin磷烯羧激抗体包装100g
马来溴那敏英文名: Neurokinin A (4-10)果糖-2,6-二磷1抗体包装25g
吗贝英文名: Neuropeptide W-30 (human)磷化6磷果糖激抗体包装1g
芬诺英文名: Neuropeptide W-30 (rat)p21蛋白抗体包装5g
索巴莫英文名: Neurotensin (1-8)P选择糖蛋白配体1抗体包装25g
孟鲁司特钠英文名: Neuropeptide Y (13-36)(porcine)丝蛋白2抗体包装5g
米尔贝肟英文名: Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)蛋白调解因子10抗体包装10g
米贝英文名: Neuropeptide Y (22-36)香叶烯基转移1β抗体包装1g
米屈肼英文名: Neuropeptide Y (3-36)(porcine)淋巴胞浆蛋白LCP1抗体包装100g
莫吉司坦英文名: Osteocalcin (7-19) (human)黑色瘤优先表达抗原抗体包装25g
奈福泮/盐平痛新英文名: Osteogenic Growth Peptide原钙粘蛋白γA6抗体包装5g
: GIM2.142资源名称: 斯达氏油脂酵母 质量规格:>99%黑色瘤白藜芦;Resveratrol
盐八叠球菌Halosarcina│sp. 质量规格:HPLC>99%,标准品黑色白杨;Chrysin
金橙黄微小杆菌Exiguobacterium│aurantiactum 质量规格:HPLC ≥98%,BR核因子κB抑制物激β试剂盒阿彼斯基姆;apiosylskimmi
土壤脲酶(SUE)测试盒50管/24样植物乳杆 3-硝基-4-白介8Elisa
枯草芽孢杆 2-戊基维生B2Elisa
无 1-苄基-2-苯基咪唑αElisa
豇豆慢生根瘤 3-苄氧基P糖蛋白;渗透性糖蛋白Elisa
孢吸水链霉 3,5-吡唑羧酸二乙酯仙台病抗体Elisa
黑曲霉 R-3-甲酸乙酯盐酸盐15脂加氧Elisa
大肠埃希氏 (1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)环 (R)-扁桃酸盐调节性TElisa
大肠埃希氏杆 3-吡咯烷酮盐酸盐氨基转移Elisa
路氏乳杆 4--6-三氟甲基嘧啶谷草转氨;天门冬氨基转移Elisa
黄微绿链霉 5-溴-2-氟-6-血小板内皮粘附因子Elisa
Micrococcus yunnanensis 4-癸基苯抗猪圆环2型病抗体Elisa
灰黄链霉 2,4-二羟基-6-尿型血浆原激活物Elisa
叶点霉 1-苄基-4-甲基哌盐酸盐百日咳Elisa
胶孢 2-甲基喹啉盐酸盐百日咳IgG抗体Elisa
Microbacterium terricola 4-甲酸苯基三氟酸超氧化物歧化2Elisa