10153ES60-Hieff Canace® 高保真DNA聚合酶_pcr系列-翌圣生物科技（上海）股份有限公司手机版

详细介绍

产品信息

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
Hieff Canace® 高保真DNA聚合酶	10153ES10	10 U	115.00
	10153ES60	100 U	695.00
	10153ES76	500 U	2,585.00
	10153ES80	1000 U	4,785.00

产品描述

Hieff Canace^® Plus High-Fidelity DNA Polymerase基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase，经基因工程改造而成。该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性，其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍，是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。酶溶液中添加了常温可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的两种单克隆抗体，可简便地进行高特异性的Hot Start PCR，极大提高了扩增的检出率和产物的特异性。酶溶液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力，扩增目的片段的长度可长达13 kb。本产品配备了优化缓冲液，使得该酶适用于复杂模板的扩增。扩增产物为平末端。

产品组分

组分编号	组分名称	产品规格
组分编号	组分名称	10153ES10 （10 U）	10153ES60 （100 U）	10153ES76 （500 U）	10153ES80 （1000 U）
10153-A	Hieff Canace^® Plus High-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL)	10 μL	100 μL	500 μL	500 μL×2
10153-B	2×Canace^® Plus PCR buffer（含Mg2+，dNTPs）	300 μL	3×1 mL	15×1 mL	30×1 mL
10153-C	6×DNA Loading Buffer	120 μL	1.2 mL	6 ml	12 ml

产品应用

基因克隆；复杂DNA模板扩增；高通量建库。

活性定义

用活性化的大马哈鱼DNA为模板/引物，74°C，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1 U。

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存。有效期1年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

推荐PCR反应体系

组分	体积	终浓度
ddH2O	to 50 μL	-
2×Canace® Plus PCR buffer (含Mg2+，dNTPs)	25 μL	1×
DNA模板	适量	-
Primer正向 (10 μM)	2 μL	0.4 μM
Primer反向 (10 μM)	2 μL	0.4 μM
Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL)	1 μL	1 U/50 μL

【注】：

1）试剂使用：使用前要充分解冻混匀。

2）Mg2+终浓度：体系终浓度为2mM。如有特殊需要，可用50 mM MgCl2，以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索。

3）高GC模板：在体系中加入终浓度为3%的DMSO可能有利于扩增。

4）不同模板的推荐使用量（25 μL反应体系）：

模板种类	扩增片段1 kb-10 kb
基因组DNA	50 ng-200 ng
质粒或病毒DNA	10 pg-20 ng
cDNA	1-2.5 μL（不超过PCR反应总体积的1/10）

PCR扩增程序：有以下三种程序可选择，优先选择两步法程序。

两步法程序（优先推荐）：三步法程序（常规程序）：

循环步骤	温度	时间	循环数	循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	98°C	3 min	1	预变性a	98°C	3 min	1
变性	98°C	10 sec	30-35	变性	98°C	10 sec	30-35
延伸	68°C	30 sec/kb	30-35	退火b	60°C	20 sec
终延伸	72°C	5 min	1	延伸c	72°C	30 sec/kb
				终延伸	72°C	5 min	1

梯度温度退火程序（难扩增基因推荐程序）: *不同扩增程序下的特点：

步骤	温度	时间	循环数	程序类型	两步法	三步法	梯度退火
预变性	98°C	3 min	1	速度	最快	中等	慢
变性	98°C	10 sec	15，每个循环降低1℃	特异性	高	中等	高
梯度退火	70-55°C	20 sec		PCR产量	中等	最高	中等
延伸	72°C	30 sec/kb		检出率	高	中等	高
变性	98°C	10 sec	20
正常退火	55°C	20 sec
延伸	72°C	30 sec/kb
终延伸	72°C	5 min	1

【注】：

a. 预变性温度和时间：推荐温度：98°C，时间：3 min，高GC含量模板5-10 min。

b. 退火温度和时间：推荐温度：60°C，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。

c. 延伸温度和时间：推荐温度：72°C。时间：30 sec/kb，复杂模板根据实际情况可延长至60 sec/kb。

相关产品

产品名称	货号	规格
2×Hieff Canace^® Plus PCR Master Mix (With Dye) 高保真酶预混液	10154ES03/08	1 mL/5×1 mL
Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶	10148ES60/76/80	100 U/500 U/1000 U
2×Hieff Canace^® Gold PCR Master Mix 高保真酶预混液HOT	10149ES03/08	1 mL/5×1 mL
Hieff CloneTM Zero TOPO-Blunt Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒HOT	10909ES20	20 T
Hieff CloneTM Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点）	10910ES20	20 T
Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒HOT	10911ES20	20 T
Hieff Clone^®Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒HOT	10912ES10	10 T
Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒HOT	11003ES10	10 T
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit 多点突变试剂盒HOT	11004ES10	10 T

HB220407

产品简介

详细介绍

常用功能直达