中国仓鼠卵巢细胞；CHO-rFVIII-11说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称中国仓鼠卵巢细胞；CHO-rFVIII-11说明书
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。 
培养条件   10%FBS
传代方法  无
传代情况 1:3传代，3-4天传1次
冻存条件  C5
支原体检测 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
STR  阴性
同工酶 
染色体  未做

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

 碱性蓝11    分子式：    458.05    分子量：     C29H32N3.Cl    英文名称：    Basic Blue 11    CAS号：    2185-86-6    
二乙酸荧光素(FDA)    分子式：    416.38    分子量：     C24H16O7    英文名称：    Two acetic acid fluorescein (FDA)    CAS号：    596-09-8    
 4-(二乙氨基)    分子式：    193.24    分子量：     C11H15NO2    英文名称：    4- (Er Yi) water Yang aldehyde    CAS号：    17754-90-4    
 (R)-alpha-Methylaspartic acid-4-tert-butyl ester    分子式：    203    分子量：     C9H17NO4    英文名称：    (R) acid-4-tert-butyl ester -alpha-Methylaspartic    CAS号：    1231709-25-3    
 D-果糖-1-磷酸钡盐    分子式：    395.45    分子量：     C6H11BaO9P    英文名称：    D- fructose -1- phosphate    CAS号：    7865    
 聚偏氯乙烯胶乳    分子式：     C6H8N3O2R    分子量：        英文名称：    Polyvinyl chloride latex    CAS号：        
 劳氏紫    分子式：    263.7459    分子量：     C12H10ClN3S    英文名称：    Thionine    CAS号：    581-64-6    
 孔雀石绿    分子式：    927.01    分子量：     C52H54N4O12    英文名称：    Malachite green    CAS号：    2437-29-8    
 Ε酸(1-萘酚-3,8-二磺酸纳)    分子式：    348.26    分子量：     C10H6Na2O7S2    英文名称：    Epsilon acid (1- two -3,8- naphthol sulfonic acid sodium)    CAS号：    83732-80-3    
 芽孢染色液    分子式：        分子量：        英文名称：    Spore staining solution    CAS号：    67ykh    
 α-甲基丙烯酸    分子式：    86.09    分子量：     C4H6O2    英文名称：    Alpha methyl acrylic acid    CAS号：    79-41-4    
 环丁砜    分子式：    120.17    分子量：     C4H8O2S    英文名称：    Sulfolane    CAS号：    126-33-0 100mL    RIPA 裂解液 ( 中 )    
20μL    COX IV 兔单抗    
0.5mL    dNTP 溶液，2.5mM    
1个    0.5mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)    
Illumina 高通量 DNA 测序    D007-1    1次
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞    130560-10    0.1mL×10
100μL    小鼠抗 T7 标签单抗    
25g    甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷    
100mL    三氟    
1000 支    200 μL RNase-free 黄吸头 ( 袋装 )    
10 管    穿刺培养基    
Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )    23-0240-100    100μL
柱式腐殖酸清除剂    60801-100    100 次
20L    SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )    
100 次    dNTP 和引物清除剂    
20 次    包涵体微量纯化试剂盒    
50 次    植物叶绿体蛋白提取试剂盒    
固蓝 BB 盐    CAS5486-84-0    5g
包涵体大量纯化试剂盒    90510-2    2次
20L    长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(>30KD)    
50 次    两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)