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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:高铁还原酶(FCR)微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6952
分类:其它系列
商品介绍:
高铁还原酶催化高铁螯合物中的Fe3+还原为Fe2+,在部分物种铁元素的吸收中有重要作用。
测定原理:
FCR催化Fe3+还原为Fe2+,Fe2+与ferrozine反应显色,在562nm下有特征吸光值。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体 延伸突触蛋白2抗体
细胞角蛋白16抗体 延伸突触蛋白1抗体
细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体 延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗体
钙粘蛋白23抗体 腺嘌呤二核苷酸酶1抗体
p450 2s1抗体 核苷酸转氢酶抗体
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa分析检测试剂盒
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa检测试剂盒
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高铁还原酶(FCR)微量法测试盒Dansyl chloride 100mg DNA 电泳分子量标准 (3)pUC19/MspI50 次
Di-2-ANEPEQ 5mg DNA 电泳分子量标准 (3)pBR322/MspI50 次
Di-8-ANEPPS5mg DNA 电泳分子量标准 (3)pBR322/BstN I50 次
DiBAC4(3)25mg DNA 电泳分子量标准 (250-1500 bp)50 次
Dihydroethidium( 超氧化物阴离子荧光探针 )5mg DNA 电泳分子量标准 (200-5000 bp)
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。