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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:乙酰羧化酶(ACC)微量法测试盒
规格 : 100管/48样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6646
分类:脂肪酸代谢系列
商品介绍:
ACC在生物体内催化乙酰羧化生成丙二酰,是脂肪酸和许多次生代谢产物合成的关键酶。ACC的活性在一定程度上决定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。
测定原理
ACC能够催化乙酰、NaHCO3和ATP生成丙二酰、ATP和无机磷,通过钼酸铵定磷法测定无机磷的增加量来测定ACC活性。
需自备的仪器和用品
分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
腺嘌呤0酸核糖转移酶抗体 组蛋白精氨酸甲基转移酶5抗体
0酸化水通道蛋白2抗体 组蛋白甲基转移酶SMYD4抗体
ADP核糖基化因子1抗体 组蛋白甲基转移酶SMYD2抗体
ADP核糖基化因子5抗体 组蛋白甲基化KMT3B抗体(雄激素受体激活蛋白)
ADP核糖基化因子结合蛋白抗体 组蛋白H4抗体
大鼠白介素33(IL33)elisa检测试剂盒
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乙酰羧化酶(ACC)微量法测试盒大提柱式细菌 RNAout5次 柱式内毒素清除剂1.5mL
一管式病毒 RNAout50 次 柱式毛发 DNAout50 次
一管式病毒 RNAout200 次 柱式昆虫 RNAout50 次
柱式病毒 RNAout50 次 柱式昆虫 mtDNAout,测序级10 次
柱式病毒 RNA-DNA 双提试剂盒50 次 柱式昆虫 DNAout50 次
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。