碱性蛋白酶可见分光光度法测试盒
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碱性蛋白酶可见分光光度法测试盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-03-14 15:38:41
280
属性:
供货周期:现货;规格:50管/24样;货号:GOY-01S6623;应用领域:化工;主要用途:仅用于科研;
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产品属性
供货周期
现货
规格
50管/24样
货号
GOY-01S6623
应用领域
化工
主要用途
仅用于科研
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上海谷研实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:碱性蛋白酶可见分光光度法测试盒
规格50/24
测试方法可见分光光度法
货号:GOY-01S6623
分类:蛋白酶系列
商品介绍:
AKP
是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝氨酸蛋白酶。此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。

测定原理:

在碱性条件下,AKP水解酪蛋白生成酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,测定680nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、0.5 mL EP管和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4保存;
测定步骤
1
分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2
将试剂一、二、三37(哺乳动物)25(其它物种)预热10分钟。
3
加样表:

图2.jpg

样本的前处理
FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后48000g离心10min,取上清测定。
胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)1510的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4200g离心5min,弃沉淀,取上清在48000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后48000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤提取粗酶液。
0酸化驱动蛋白样蛋白1抗体     内皮细胞纤溶酶原激活抑制蛋白1抗体

EB病毒核抗原-3B抗体     内皮细胞特异性分子1抗体

内皮素B受体抗体     内皮细胞受体蛋白激酶抗体

附睾蛋白酶抑制蛋白     内皮细胞受体蛋白激酶B3抗体

外生性骨疣样蛋白2抗体     内皮细胞受体蛋白激酶A抗体(肿瘤坏死因子α诱导蛋白4
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FBP活性计算:
1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
FBP
nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(W ×V÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反总:反应体系总体积,1×10-3 LεNADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.1 mLV样总:加入提取液体积,1mLT:反应时间,5 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g


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