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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:血清低密度脂蛋白(LDLC)微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6660
分类:脂肪酸代谢系列
商品介绍:
低密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,与冠心病的发生和动脉粥样硬化损伤呈正相关,是脂类疾病分类和风险预测的一个重要指标。
测定原理
用沉淀剂分离血清中的低密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸,从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品
离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
同源转录因子DLX1抗体 胚胎干细胞关键蛋白抗体
淋巴细胞抗原75抗体 胚胎干细胞关键蛋白190抗体(N端)
胞浆动力蛋白中间链1抗体 胚胎干细胞RAS蛋白抗体
胞浆动力蛋白中间链2抗体 胚胎发育相关蛋白Nodal抗体
锌指蛋白DZIP1抗体 疱疹病毒相关泛素特异性蛋白酶7抗体
核黄素转运因子1(RFT1)elisa分析检测试剂盒
核黄素转运因子1(RFT1)elisa检测试剂盒
核黄素转运因子2(RFT2)elisa分析检测试剂盒
核黄素转运因子2(RFT2)elisa检测试剂盒
核黄素转运因子3(RFT3)elisa分析检测试剂盒
血清低密度脂蛋白(LDLC)微量法测试盒大肠杆菌 Escherichia coli 大肠埃希菌ATCC8099冻干粉
丝球毛霉 粉红寄生菌
平盖灵芝(树舌) 侧耳
谢瓦曲霉 黄直丝链霉菌
鼠伤寒沙门菌冻干粉 苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。