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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:柠檬酸(CA)可见分光光度法测试盒
规格 : 50管/48样
测试方法: 可见分光光度法
货号:GOY-01S6569
分类:三羧酸循环系列
商品介绍:
CA又称枸橼酸,广泛存在于各种生物胞质中,是生物体内重要的有机酸。CA也存在于线粒体基质中,是三羧酸循环第一步反应的产物,与脂肪、蛋白质和糖最终转化为二氧化碳密切相关。
测定原理
酸性条件下,柠檬酸可将Cr6+还原成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。
实验中所需仪器及设备
可见分光光度计、低温离心机、掌上离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
前列腺素E受体3抗体 锚蛋白重复域28抗体
埃兹蛋白抗体 锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体
转录因子E2F-4抗体 锚蛋白重复结构域蛋白9抗体
细胞转录因子ELK1抗体 锚蛋白重复结构域蛋白50抗体
内皮素-1单克隆抗体 锚蛋白重复结构域蛋白42抗体
锦葵色素-O-葡萄糖苷含量测试盒
进行凝集(aggregation)采用典型的夹心法酶联免疫吸附测定。所提供的elisa检测试剂盒是典型的夹心法酶联免疫吸附测定elisa检测试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经(biotin)标记。样品和标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因
柠檬酸(CA)可见分光光度法测试盒发酵性酵母 草菇
天蓝色链霉菌 福氏志贺氏菌
田菁根瘤菌 杜鹃盘多毛孢霉 Pestalotia rhododendri
木醋杆菌 石刁柏(芦笋)拟茎点霉 Phomopsis asparagi
肺炎链球菌ATCC49619冻干粉 烟草疫霉* Phytophthora nicotianae
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。