转氢酶1微量法测试盒
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参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-03-14 14:50:11
269
属性:
供货周期:现货;规格:100管/96样;货号:GOY-01S6560;应用领域:化工;主要用途:仅用于科研;
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产品属性
供货周期
现货
规格
100管/96样
货号
GOY-01S6560
应用领域
化工
主要用途
仅用于科研
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上海谷研实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,4避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,4避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20保存,禁止反复冻融。

产品名称

规格

测试方法

货号

转氢酶1微量法测试盒

100/96

微量法

GOY-01S6560

商品介绍:
TH位于线粒体的内膜上,又称为线粒体复合体六,催化NADH+NADP+NAD++NADPH相互转化,调节线粒体NAD(H)NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2,催化NADPHNAD+生成NADP+NADH

测定原理:

NADHNADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+TH-2催化APAD+还原生成APADHAPADH375nm有特征光吸收,测定375nm光吸收的增加速率,来计算TH-2活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
测定操作表:

图1.jpg

酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO
活性(nmol/min/mg prot= ×V反总÷V×Cpr÷T= 18×A460÷Cpr
2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO
活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷V÷V样总×W÷T= 18×A460÷W
3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO
活性(nmol/min/104cell= ×V反总÷V÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量
(4)
按液体体积计算
酶活性定义:在pH7.2,温度为37条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO
活性(nmol/min/mL= ×V反总÷V÷T= 18×A460
ε
:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cmd:比色皿光径,1cmV反总:反应总体积,0.2mLV样:反应中样本体积,0.05mLV样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,gT:反应时间,30min
b.
96孔板测定的计算公式如下
1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO
活性(nmol/min/mg prot= ×V反总÷V×Cpr÷T= 36×A460÷Cpr
2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO
活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷V÷V样总×W÷T= 36×A460÷W
3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
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