其他品牌 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:硝酸还原酶(NR)(NADH速率法)微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6477
分类:氮代谢系列
商品介绍:
NR( EC 1.7.1.3)广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
测定原理
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;NADH在 340 nm 有最大吸收峰,通过测定NADH减少速率来表示NR活性。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
3号染色体开放阅读框25抗体 细胞周期蛋白SG2N抗体
转录激活因子MYB抗体 细胞周期蛋白N端结构域蛋白2抗体
原癌基因cMAF抗体 细胞周期蛋白N端结构域蛋白1抗体
19号染色体开放阅读框46抗体 细胞周期蛋白G相关激酶抗体
8号染色体开放阅读框70抗体 细胞周期蛋白3抗体
大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)elisa检测试剂盒
大鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa检测试剂盒
大鼠膜联蛋白A2(ANXA2)elisa检测试剂盒
大鼠膜联蛋白A5(Annexin A5)elisa检测试剂盒
大鼠膜联蛋白A5(Annexin A5)elisa检测试剂盒
硝酸还原酶(NR)(NADH速率法)微量法测试盒去离子甲酰胺100mL 间充质干细胞脂防细胞分化生长因子5mL
BLOTTO 溶液100mL 间充质干细胞生长因子5mL
酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL 间充质干细胞生长因子 - 无血淸5mL
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL 间充质干细胞软骨细胞分化生长因子5mL
Denhardt 溶液,50×100mL 间充质干细胞成骨细胞分化生长因子5mL
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。