ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;WSSV-K1培养
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;WSSV-K1培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-HSP75/TRAP-1 /FITC 荧光素标记热休克蛋白-75抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-PIRH2/FITC 荧光素标记泛素连接酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB9 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族9抗体 规格 0.2ml
Donkey Anti-Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的驴抗羊IgG 0.1ml
GLT25D1 英文名称: 糖基转移酶25结构域1/前胶原半乳糖基转移酶1抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗小鼠IgG 规格 0.1ml
Anti-PIRH2/FITC 荧光素标记泛素连接酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
MUC5B(Human mucin-5 subtype B) ELISA kit 人粘蛋白/粘液素5BMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-ACY 3/HCV-HCBP1 丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MIIP IGFBP2结合蛋白/迁移和侵润抑制蛋白抗体 规格 0.2ml
DNase- I (Human deoxyribonuclease I ) ELISA Kit 人脱氧核糖核酸酶Ⅰ 96T
RNF130 英文名称: 环指蛋白130抗体 0.2ml
CGGBP1 英文名称: CGG结合蛋白1抗体 0.1ml
Anti-ACY 3/HCV-HCBP1 丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
SDHB 英文名称: 铬细胞瘤患者抑癌基因SDHB抗体 0.1ml
FAM98B 英文名称: FAM98B蛋白抗体 0.2ml
毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗体 Anti-ChRM1 0.1ml
Anti-RELN(Reelin)/FITC 荧光素标记络丝蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗体 规格 0.1ml
MBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘碱性蛋白(多肽)大鼠Multi-class antibodies规格: 0.5mg
BK(Mouse bradykinin) ELISA Kit 小鼠血管舒缓激肽Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CD79A/IGBP-1 /FITC 荧光素标记免疫球蛋白结合蛋白-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 双PHD-D4锌指蛋白2抗体 规格 0.2ml
CMV 巨细胞病毒 IgG(间接法二步法)
MURF3 英文名称: 肌肉特异性环指蛋白3抗体 0.2ml
ALAD 英文名称: δ基乙酰丙酸脱水酶抗体 0.2ml
Anti-CD79A/IGBP-1 /FITC 荧光素标记免疫球蛋白结合蛋白-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。