ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 兴国鲤尾鳍细胞;XGL培养
形态特性 成纤维细胞样
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞来源于一兴国鲤鱼的尾鳍组织。1983年由中国科学院昆明细胞库建立。培养温度26-28℃。
培养条件 M-199:
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
传代方法 1:
2传代;7-10天一次
传代情况 P5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
兴国鲤尾鳍细胞;XGL培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-GAI3/FITC 荧光素标记抑制型G蛋白α3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-NPM (Thr199) /FITC 荧光素标记磷酸化核仁磷酸蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Brain protein CG6 脑蛋白CG6抗体 规格 0.2ml
Apelin 脂肪炎症因子Apelin抗原 0.5mg
HEBP1 英文名称: 血红素结合蛋白1抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh RFESD RFESD蛋白抗体 规格 0.2ml
Anti-Phospho-NPM (Thr199) /FITC 荧光素标记磷酸化核仁磷酸蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
IL-8 小鼠白介素-8Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-ERAB 内质网Aβ相关结合蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MT-ND6 NADH复合体6抗体 规格 0.1ml
C1q(Human Complement 1q) ELISA Kit 人补体1q 96T
SCN7A 英文名称: 钠离子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗体 0.1ml
C3orf18 英文名称: 3号染色体开放阅读框18抗体 0.2ml
Anti-ERAB 内质网Aβ相关结合蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/APC APC标记的兔抗人IgM 0.1ml
GLS1 英文名称: 谷酰胺酶1抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh alpha-L-arabinofuranosidase 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗体 规格 1ml
Anti-KIF17/FITC 荧光素标记驱动蛋白家族KIF17抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Gold 胶体金标记的兔抗豚鼠IgM 规格 2ml
Anti-SLC4A4/FITC 荧光素标记碳酸氢钠协同转运蛋白4-A4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ALCAM 小鼠白细胞活化粘附因子Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-ER-Alpha 雌激素受体α抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MSH6 错配修复蛋白6抗体 规格 0.1ml
EMAb(Human Endometrium Antibody,EMAb ) ELISA Kit 人抗子宫内膜抗体 96T
phospho-STAT5a(Ser726) 英文名称: 磷酸化信号转导和转录激活因子5a抗体 0.1ml
Cox A16 polymerase3D 英文名称: 柯萨奇病毒A16型聚合酶3D 0.2ml
Anti-ER-Alpha 雌激素受体α抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。