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面议HTRF IP-One 检测试剂盒可检测肌醇单磷酸的积累,肌醇单磷酸是由磷脂酶 C(PLC)级联激活诱导产生的 IP3 的稳定下游代谢产物。该试剂盒可直接表征作用于贴壁细胞或悬浮细胞中 Gq 偶联受体的所有类型化合物。从高通量筛选(HTS)到构效关系(SAR),IP-One 已被证明比传统检测方法具有更多优势。
Assay Points | 1K/20K/500K |
Assay Technology | HTRF |
Brand | HTRF |
Product Group | Kit |
Quantity | 1 |
Shipping Conditions | Shipped Ambient |
Therapeutic Area | Cardiovascular Infectious Diseases Metabolism/Diabetes NASH/Fibrosis Neuroscience Oncology & Inflammation Rare Diseases |
Unit Size | 1K/20K/500K Assay Points |
分析原理:
该试剂盒基于一种竞争形式,涉及用穴状化合物(供体)标记的特异性抗体和与 d2 偶联的 IP1(受体)。细胞产生的天然 IP1 与 d2 标记的 IP1 竞争结合单克隆抗 IP1 Tb²⁺穴状化合物。将氯化锂添加到细胞刺激缓冲液中,导致受体激活时 IP1 积累。
分析方案:
IP-One 检测具有简化的方案,仅需两个孵育步骤:通过配体或目标化合物刺激细胞;使用 HTRF 试剂检测 IP1。该方案在细胞刺激后仅需一小时的单一孵育期。
分析细节:
1. IP-One Gq 检测的特异性:
IP-One 确保信号特异性,仅测量 IP-1,这是一种仅由磷脂酶(PLC)作用产生并由 G 蛋白偶联受体(GPCR)介导的分析物。
相比之下,钙响应本质上是复杂的。钙释放通常由非 G 蛋白机制触发,包括钙可渗透通道、钙泵、钙转运蛋白。
2.标准曲线特征:
检测窗口、灵敏度、重现性和特异性:IP-One 毫不妥协!