检测原理：
细胞上清液、样本或标准品直接分配到检测板中，通过 HTRF® 试剂进行检测（384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板，20 微升）。用 HTRF 供体和受体标记的抗体预先混合，并在一个分配步骤中加入，以进一步简化检测程序。通过简单地按比例调整每次添加的体积，该检测可以扩展到 1536 孔格式。

检测数据分析：
四参数逻辑（4PL）曲线通常被推荐用于拟合 ELISA 标准曲线。这种回归能够在比线性分析更宽的浓度范围内准确测量未知样本，使其非常适合用于分析细胞因子释放等生物系统。

检测细节：
人 IL6 试剂盒的技术规格

分析性能：
批内和批间

稀释线性：
从这些实验中获得的出色的回收率百分比显示了该检测的良好线性。

加标回收：
将重组细胞因子添加到血清样本中，并将从标准曲线获得的响应与计算出的预期值进行比较。观察到的 100% 回收率验证了用于该检测的样本基质。

检测验证：
用 JTE607 抑制 THP1 细胞中 IL6 的分泌：
以每孔 100,000 个细胞的密度接种 THP1 细胞，在存在 2 µg/mL LPS 的情况下，用不断增加浓度的 JTE607 孵育 18 小时。然后将 16 µL 的上清液转移到白色检测板（384 孔低体积）中，用人 IL6 检测进行分析。

LPS 刺激的外周血单个核细胞（PBMC）中 IL6 的分泌：
以每孔 50,000、100,000 和 400,000 个细胞的密度接种 PBMC，用不断增加浓度的 LPS（0、0.02、0.2、2 µg/mL）刺激 18 小时。然后将 16 µL 的上清液转移到白色检测板（384 孔低体积）中，用人 IL6 检测进行分析。