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面议干扰素 γ(IFN gamma)是一种由 T 细胞和 NK 细胞在应对病毒感染或炎症状态时分泌的促炎性细胞因子。IFN gamma 在先天性和适应性免疫中发挥着重要作用,它能促进 T 细胞分化为 TH1 细胞并促进调节性 T 细胞(Treg)的发育,同时抑制 T 细胞分化为 TH17 细胞。它的抗肿瘤特性已被用于骨质疏松症的治疗,并且在免疫肿瘤学中引起了极大的关注,它可以提高膀胱癌或卵巢癌患者的生存率。
对血清样本的评估通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测可能具有足够的灵敏度来检测血清或血浆中的低水平分析物。
产品规格:
检测点数:500/10000。
检测目标类型:试剂盒。
检测技术:均相时间分辨荧光(HTRF)。
品牌:HTRF。
数量:1。
运输条件:干冰运输。
治疗领域:肿瘤与炎症。
规格尺寸:500/10000 检测点数。
分析原理:
将细胞上清液、样本或标准品直接分配到检测板中,通过 HTRF 试剂(384 孔低体积白色板或 Cisbio 低体积 96 孔板,20µL)进行检测。用 HTRF 供体和受体标记的抗体预先混合,并在一个分配步骤中加入,以进一步简化检测程序。只需按比例调整每次添加的体积,该检测就可以扩展到 1536 孔格式。
分析数据:
四参数逻辑(4PL)曲线通常被推荐用于拟合酶联免疫吸附测定(ELISA)标准曲线。与线性分析相比,这种回归能够在更宽的浓度范围内准确测量未知样本,使其非常适合用于分析细胞因子释放等生物系统。
分析细节:
人 IFN gamma 试剂盒的技术规格:
样本量:16µL。
最终检测体积:20µL。
试剂盒组成:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液和方案。
检测限和定量限(在稀释液中):14pg/mL 和 21pg/mL。
范围:21 – 4000pg/mL。
出结果时间:室温下过夜。
校准:NIBSC(82/587)值(IU/mL)= 0.019×HTRF 人 IFNγ 值(pg/mL)。
物种:仅人类。
分析性能:
批内和批间:
批内(n = 24):对 3 个样本中的每个样本进行了 24 次测量,并计算每个样本的变异系数(% CV)。
批间(n = 4):在 4 个不同的实验中对每个样本进行测量,并计算每个样本的变异系数(% CV)。
稀释线性:从这些实验中获得的出色的回收率百分比显示了该检测的良好线性。
加标回收:将相同量的重组细胞因子添加到 2 个不同的血清样本中,并将从标准曲线获得的一组响应与计算的预期值进行比较。观察到的约 100% 的回收率验证了用于该检测的样本基质。
分析验证:
用佛波酯(PMA)和离子霉素刺激的外周血单个核细胞(PBMC)中的 IFNγ 分泌:将 PBMC 以 50、100、200 和 400 千个细胞 / 孔的密度接种,用添加到 500ng/mL 离子霉素溶液中的不断增加浓度的 PMA(0、1、50ng/mL)刺激 3 小时。然后将 16µL 上清液转移到白色检测板(384 孔,低体积)中,用人 IFNγ 检测试剂盒进行分析。