磷脂酶D(PLD)测试盒

分光光度法 50 管/48 样

产品简介：

磷脂酶 D（EC 3.1.4.4）即磷脂酰胆-碱水解酶，是催化磷酸二酯键水解和碱基交换反应的一类酶的总称，广泛存在于高等动植物和细菌等多种生物体中，具有参与细胞脂质代谢、信号传导、生物膜形成的抗逆境胁迫等生理功能。磷脂酶 D 催化水解底物 O-(4-硝基苯基)胆-碱（NPPC），并在外加酸性磷酸酶的作用下产生对硝基苯-酚(PNP)，该产物在 405nm 处有最大吸收峰。通过检测 PNP 在 405nm 下的增加速率，即可得到 PLC 酶活性大小。

所需的仪器和用品： 

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、水浴锅或恒温培养箱、可调式移液器和蒸馏水。

磷脂酶 D（PLD）活性测定： 

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！ 

1、样本制备： 

① 组织样本：取约 0.1g 组织（水分充足的果实样本可取 0.2-0.3g），加入 1mL 提取液（用前摇匀再用），进行冰浴匀浆，13000rpm，4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。

② 细菌/细胞样本：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；13000rpm 4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。磷脂酶D(PLD)测试盒