维生素E（VE）含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC1425
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：自备无水乙醇，常温保存。

2. 试剂二：自备*，常温保存。

3. 试剂五贮备液的制备：将试剂五的粉剂溶于2 mL无水乙醇配制成贮备液，2-8℃避光保存待用。

4. 试剂五应用液的制备：取试剂五贮备液用无水乙醇20倍稀释后使用，建议当天配制当天使用。

5. 标准品：临用前加入1 mL试剂三，配成20 mg/mL的标准品溶液。

产品说明：
维生素E（Vitamin E）是一种天然脂溶性抗氧化剂，能阻断机体不饱和脂肪酸的过氧化，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，并可清除超氧阴离子自由基，具有延缓衰老、预防溶血性贫血等作用，在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。
VE还原Fe³⁺为Fe²⁺，Fe²⁺与1,10-菲罗啉产生有色络合物，在510nm有特征吸收峰。
技术指标：
低检出限：2.9178 μg/mL
线性范围：3.125-100 μg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、无水乙醇、*、蒸馏水和EP管。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件

注意事项：

1. 离心后，在吸取上层*抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入，以免影响试验结果。

2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

3. 若反应体系产生沉淀，建议将待测样本用试剂三进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。

4. 比色皿需用无水乙醇冲洗，勿用蒸馏水以防出现分层影响试验数据。

5. 显色结束后尽快完成测定。

实验实例：

1. 取0.1g核桃依次加入200µL蒸馏水，300µL的试剂一，500µL试剂二进行匀浆研磨，匀浆后在漩涡混匀仪上震荡5min（充分抽提），于25℃，5000g离心5min，取上层正*抽提液300µL加入到900µL无水乙醇中（上层抽提液：无水乙醇=1:3），之后按照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA测定管=A测定管-A对照管=0.336-0.046=0.29，根据标准曲线y=0.0042x+0.1849，计算x=25.02，按样本质量计算维生素E含量得：

VE含量（μg/g质量）=2×x÷W=2×25.02÷0.1=500.4 μg/g质量。
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