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游离脂肪酸(FFA)含量检测试剂盒 代谢
产品简介 :
FFA 既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。血清中 FFA 的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。
FFA 能与铜离子结合形成脂肪酸铜盐;利用铜试剂法测定铜离子含量,即可推算出游离脂肪酸含量。
试验中所需的仪器和试剂:
研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、无水乙醇和双蒸水。
产品内容 :
试剂一×1 瓶,用 30ml 双蒸水充分溶解,4℃保存;
试剂二×1 瓶,临用前,按液体一: :液体二=49:49:2 的比例配制试剂二;
试剂三×1 瓶,临用前,按液体三:液体四:液体五=2:1:17 的比例配制试剂三;
试剂四×2 瓶,临用前,取 6ml 无水乙醇充分溶解 1 支试剂四,待溶解后,加入0.12ml 稀释 10 倍后液体四,充分混匀;
标准品×1 支,临用前配制,向标准品中加 1ml 充分溶解,然后取该溶液,用稀释 100 倍,即为 500µmol/L 的标准溶液。
操作步骤 :
一 、 FFA 的 提取 :
1、血液中 FFA 测定:将所取血液,室温静置 1 h 后,于 4 ℃ 离心机 3500 rpm 离心 15min,取上层血清置于-20℃冰箱保存,待测
2、组织中 FFA 含量测定:组织用生理盐水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,制成 10%的匀浆,8000rpm,4℃离心 10min,取上清,待测。
二 、 FFA 含量的测定 :
按下表操作:
空白管 | 标准管 | 待测管 | |
试剂一(μl) | 500 | 500 | 500 |
双蒸水(μl) | 50 | / | / |
500μmol/l的标准液(μl) | / | 50 | / |
待测液(μl) | / | / | 50 |
试剂二(μl) | 2500 | 2500 | 2500 |
试剂三(μl) | 800 | 800 | 800 |
试剂四(μl) | 200 | 200 | 200 |
振荡混匀2min,4000rpm离心10min,取下层溶液2ml | |||
振荡混匀2min,4000rpm离心10min,取下层溶液1ml |
按照上表依次加入各试剂, 在加试剂四混匀后, 室温静止 15min, 立即于 550nm 处比色, 30min 内完成比色,记录吸光值。
FFA 含量 计算 :
1、 血液中 FFA 含量计算(µmol/L)
2、 组织中 FFA 含量计算(µmol/g mass)
注意事项 :
1、 试剂盒中多种试剂均须临用前配制,根据需要量配制试剂;试剂五须在加入前 20min 内配制。
2、 配制试剂及测定过程中尽量戴手套和口罩。
3、 加试剂五后确保静置 15min 后测定,并在 30 内 min 完成测定。
4、 该试剂盒不可用塑料比色皿和 96 孔板测定,需用玻璃比色皿。
5、 由于无水乙醇不便于运输,该试剂盒中未提供无水乙醇,请自己准备。
6、 试剂四配制应尽量晚配,可在操作到加入试剂三时,再配制试剂四。
相关文献:
《Galangin and Pinocembrin from Propolis Ameliorate Insulin Resistance in HepG2 Cells via Regulating Akt/mTOR Signaling》 作者:Yinkang Liu, Xiali Liang,Gensheng Zhang,Lingjie Kong,Wenjun Peng and Hongcheng Zhang 期刊:Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 影响因子:1.984 PMID:30420897
《Combination of shikonin with paclitaxel overcomes multidrug resistance in human ovarian carcinoma cells in a P-gp-independent manner through enhanced ROS generation》 作者:Zhu Wang, Jianhua Yin, Mingxing Li, Jing Shen, Zhangang Xiao, Yueshui Zhao, Chengliang Huang, Hanyu Zhang, Zhuo Zhang, Chi Hin Cho & Xu Wu 期刊:Chin Med 影响因子:2.265 PMID:30911326
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