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上海市所在地
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分,除了起结构支撑、物质运输等作用外,还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。 测定原理 果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇,甲醇与2,4-戊二酮反应显色,在412nm下测定吸光值;同时半乳糖醛酸在70℃下与浓硫酸反应生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸与3,5-二甲基ben酚反应产生有色物质,在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS6321399 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
炭黑曲霉9号染色体开放阅读框174抗体Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人黑色瘤免疫试剂盒
大肠埃希氏菌6号染色体开放阅读框64抗体Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人黑色免疫试剂盒
类芽孢杆菌属免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ抗体Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核因子κB抑制物激β(IKK-β)免疫试剂盒
亚细亚菌属透明质介导游走受体抗体Human ARRB2(Beta-arrestin-2) ELISA Kit人核因子κB抑制物激α(IKK-α)免疫试剂盒
东方伊萨酵母周期样Y1抗体Human CNN1(Calponin-1) ELISA Kit人核因子κB(NF-κB)免疫试剂盒
根瘤菌周期J抗体Human ProHAMP(Hepcidin prohormone) ELISA Kit人核心结合因子α1,CBFA1/RUNX2 免疫试剂盒
青紫链霉菌周期L抗体Human MMP28(Matrix metalloproteinase-28) ELISA Kit人核心蛋白聚糖(DCN)免疫试剂盒
北方蜜环菌补体C1RL链多肽抗体Human CBS(Cystathionine beta-synthase) ELISA Kit人核糖体合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫试剂盒
酿酒酵母周期M2抗体Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人核糖体蛋白S9(RPS9)免疫试剂盒
链霉菌周期T2抗体Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人核糖体蛋白S25(RPS25)免疫试剂盒
白地霉周期K抗体Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人核糖核抑止剂(RNH1/PRI/RNH)免疫试剂盒
天蓝褐链霉菌抗菌肽CAMP抗体Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人核糖核,核糖核A家族,(肝脏,嗜性粒源性神经)(RNASE2)免疫试剂盒
酿酒酵母5号染色体开放阅读框4抗体Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人核糖核(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫试剂盒
大肠埃希菌4号染色体开放阅读框44抗体Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫试剂盒
胶孢4号染色体开放阅读框33抗体Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人核基质蛋白22(NMP-22)免疫试剂盒
pET-23a4号染色体开放阅读框42抗体Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核黄激(RFK)免疫试剂盒
Microsphaeropsis arundinisMicrosphaeropsis│arundinis 质量规格:IND紫苏烯
缺陷短波单胞菌Brevundimonas│diminuta 质量规格:AR;IND苦蒿
立枯丝核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 质量规格:0.9西瑞香
果胶甲酯化程度测试盒100管/96样洲哈茨木霉 4-氟葡萄糖氧化Elisa
奇异变形 2-氟-4-羟基苯甲敏感性脂肪Elisa
盐城海杆 二(2,6,10-十二碳三烯-1,12-二基)钌(IV)脂蛋白酯Elisa
半软干酪居真细 1,5-环辛二烯(六氟乙酰酮)(I)铱肝脂Elisa
大肠埃希氏杆 4-氟苯基苯乙酮强啡肽Elisa
灰黄青霉 5-溴异喹啉血管紧张转换抑制剂Elisa
枯草芽孢杆 甲基烯酸二环戊基酯脂肪酸β氧化Elisa
鸡油 2-三氟甲基喹啉二酰基甘油酰基转移Elisa
冠突曲霉 1-[3-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol硫酸角质Elisa
环状芽孢杆 5-羟基-1-茚酮鸟核苷酸交换因子4Elisa
葡萄座腔 (R)-(-)-3-甲基-2-丁鸟核苷酸交换因子4Elisa
多粘类芽孢杆 2,2′-联嘧啶肥大β类胰蛋白Elisa
苏云金芽孢杆 4-溴苯甲砜Rhodes激Elisa
枯草芽孢杆 2-(4-溴苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶线粒体呼吸链复合物IVElisa
果生链核盘 2-甲氧基-5-(三氟甲基)苯甲线粒体呼吸链复合物VElisa