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生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321395 |
商品介绍:
测定意义 乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代谢中的关键酶,也是光下合成草酸的关键酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。 测定原理 乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
节杆菌肉碱棕榈酰基转移2抗体Human GP5(Plaet glycoprotein V) ELISA Kit人碱性亮链转录因子ATF样蛋白(BATF)免疫试剂盒
丛毛单胞菌肉碱氧位甲基转移抗体Human KL(Klotho) ELISA Kit人碱性成纤维生长因子(bFGF)免疫试剂盒
香气红冬孢锁掷孢酵母IV型胶原α3结合蛋白抗体Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA Kit人间皮(MSLN)免疫试剂盒
柠檬原小单孢菌肉碱棕榈酰基转移1B抗体Human SEPT5(Septin-5) ELISA Kit人间变性淋巴瘤激(ALK)免疫试剂盒
牛肝菌胆固27α羟化抗体Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA Kit人间α-抑制因子重链H1(ITIH1)免疫试剂盒
大肠埃希氏杆菌胆固24α7羟化抗体Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA Kit人间-alpha-抑制剂重链H4(ITIH4/IHRP/ITIHL1/PK120/PRO1851)免疫试剂盒
酿酒酵母色P450 4A1抗体Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA Kit人假定蛋白LOC677168 免疫试剂盒
布氏白僵菌(卵孢白僵菌)色P4504A22抗体(脂肪Ω羟化)Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit人离子通道蛋白抗体免疫试剂盒
肠产性大肠埃希氏菌周期蛋白依赖性激抑制剂2D抗体Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit人甲状腺抗体免疫试剂盒
谷棒杆菌胆固24S-羟化Human APLN(Apelin) ELISA Kit人甲状腺抗体(TAb)免疫试剂盒
云芝栓孔菌 (变色栓菌)猪瘟病抗体Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit人甲状腺(T4)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌色c氧化亚型2抗体Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit人甲状腺球蛋白(TG)免疫试剂盒
芹侧耳(杏鲍菇)周期G2抗体Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit人甲状腺结合球蛋白(TBG)免疫试剂盒
巨型艾耳球虫铜蓝蛋白抗体Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit人甲状腺激受体β(THRb)免疫试剂盒
嗜热链球菌CUE结构域蛋白2抗体Human SOD2(Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial) ELISA Kit人甲状腺过氧化物(TPO)免疫试剂盒
瑟氏泰勒虫(清水株)线粒体复合物NDUFS1蛋白抗体Human LPCAT2(Lysophosphatidylcholine acyltransferase 2) ELISA Kit人甲状腺肽激抗体(THAA)免疫试剂盒
AS3.582资源名称: 肉桂色曲霉 质量规格:IND罗汉果黄
NRRL330=AS3.795资源名称: 黑曲霉 质量规格:ACS reagent,95 %罗汉果皂苷IIIe
中国台湾根霉Rhizopus│formosensis 质量规格:指示剂
乙醇酸氧化酶测试盒50管/48样球色单隔孢属 4-溴三苯Ⅳ-C型胶原Elisa
植物乳杆 4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶雌受体αElisa
登户链霉 6--7-氮杂色-2,3-双加氧Elisa
海考克氏 2,4-二氟-5-甲酸Ca-ATPElisa
枯草芽孢杆 2--4-FK506结合蛋白4Elisa
黑曲霉 2,4-双(三氟甲基)苯促性腺释放受体Elisa
赭曲霉 2-溴-5-硝基三氟甲苯抗肽LL-37Elisa
柿瑞恩氏酵母 4-甲氧基苯甲酰乙超敏心肌肌钙蛋白ⅠElisa
放射型根瘤 4--3-氟苯X型胶原Elisa
都浓哈马达氏 3,4-二氨基甲酯Ras相关C3肉底物1Elisa
苏云金芽孢杆 4-叔丁基苯肼盐酸盐组蛋白脱乙酰基4Elisa
局限青霉 二甲基三硫脂肪酸结合蛋白Elisa
胶胞 氮杂环丁烷盐酸盐微纤丝关联蛋白4Elisa
草菇 2,3-二酸甲酯平滑肌肌球蛋白2AElisa
链霉 邻苯二甲酸二庚酯肌特异性增强子因子2CElisa