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商品介绍:
测定意义 尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。 测定原理 在碱性条件下,尿酶水解尿素产生氨,氨与次氯酸反应生成氯胺,再与酚衍生物作用生成绿色吲哚酚,在630nm处有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/48样 |
产品货号 | AS6321103 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
(标准品)英文名: Cetirizine 2HCl磷化表面趋化因子受体4抗体包装25g
(标准品)英文名: Cetrorelix Acetate磷化表面趋化因子受体2抗体包装5g
地红霉(标准品)英文名: Chelerythrine中心体蛋白104抗体包装100mg
地喹(标准品)英文名: Chlorhexidine Acatate/乙磷转移1抗体包装1g
地罗司(标准品)英文名: Fluvastatin sodium salt6号染色体开放阅读框163抗体包装500mg
地雷他定(标准品)英文名: Fluvastatin sodium salt6号染色体开放阅读框165抗体包装1g
磷酯(标准品)英文名: Clinafloxacin6号染色体开放阅读框168抗体包装250mg
/ 5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷(标准品)英文名: Levamisole HCl6号染色体开放阅读框173抗体包装5g
海(标准品)英文名: Levamisole HCl6号染色体开放阅读框182抗体包装1g
海杂质Ⅰ(标准品)英文名: Clomipramine HCL 6号染色体开放阅读框186抗体包装5g
海杂质Ⅱ(标准品)英文名: Clomipramine HCL 6号染色体开放阅读框191抗体包装10g
海杂质Ⅲ(标准品)英文名: Clopidogrel Bisulfate6号染色体开放阅读框195抗体包装1g
化(标准品)英文名: Clopidogrel Bisulfate6号染色体开放阅读框199抗体包装5g
帕(标准品)英文名: Clopidogrel Bisulfate7号染色体开放阅读框34抗体包装1g
普罗(标准品)英文名: Nabumetone6号染色体开放阅读框201抗体包装100g
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>98.0%雄烯二新;Mesaconitine
雅致小克银汉霉(斜面)Cunninghamella elegans 质量规格:≥98.0%雄激受体试剂盒新;Neohesperidin
墙壁圣格奥尔根菌Georgenia│muralis 质量规格:>98%,USP31,BR胸腺依赖性抗原试剂盒细叶远志皂苷;Tenuifolin
尿素氮测试盒100管/48样*灰葡萄孢 2,3,5,6-四溴对二甲苯BK病IgMkan抗体Elisa
假单胞 异丁酸香叶酯磷酯Cε链1Elisa
酿酒酵母 异丁酸橙花酯CD2关联蛋白Elisa
龟裂链霉 2-氟烯酸甲酯转化受体电位阳离子通道亚家族C成员6Elisa
金黄杆属 5--2-三氟甲苯褐黑Elisa
产氨棒杆 5--2-甲苯γ谷氨酰转移2Elisa
堀越氏芽孢杆 4-三氟乙优黑Elisa
产朊假丝酵母 柠檬酸铁 水合物雌酮1Elisa
薄层杆 3-溴-5-吡啶Rho关联含卷曲螺旋蛋白激1Elisa
产氨棒杆 反式-4-乙酰氨基环己Rho关联含卷曲螺旋蛋白激2Elisa
狂犬病病 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine总巯基Elisa
少根根霉 (R)-1,2,3,4-四氢-1-萘酸色Elisa
粉状毕翅酵母 3-吡啶甲脒蛋白聚糖Elisa
葡枝根霉 6-羟基吲唑雌受体βElisa
豌豆根瘤 2,5-二溴吡总表皮生长因子受体Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。