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商品介绍:
测定意义 GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。 测定原理 GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在540nm处有最大吸收峰,可用分光光度计测定。 所需的仪器和用品 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS632196 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
Vildagliptin(标准品)英文名: Ifosfamide促肾上腺皮质激释放因子抗体包装1g
α-甘(标准品)英文名: Ifosfamide促肾上腺皮质激释放因子抗体包装5g
α-对羟基甘(标准品)英文名: Pramipexole 2HCL monohydrate5号染色体开放阅读框54抗体包装1g
α-代-β-英文名: Pramipexole 2HCL monohydrateCD93抗体包装5g
α-基吡啶(标准品)英文名: Vinblastine Sulfate嗜粒趋化蛋白CCL6抗体包装5g
α-三联噻吩(标准品)英文名: Vinblastine Sulfate6号染色体开放阅读框81抗体包装1g
α-戊二(标准品)英文名: Vinblastine Sulfate巨噬炎性蛋白1β抗体包装1g
β-Estradiol(标准品)英文名: TemozolomideNK抑制性受体2DL4抗体包装5g
β-(标准品)英文名: TemozolomideNK抑制性受体2DS4抗体包装1g
β-环糊精(标准品)英文名: AminoglutethimideNK抑制性受体3DL1抗体包装5g
阿达唑(标准品)英文名: Aminoglutethimide7号染色体开放阅读框46抗体包装100g
阿达帕林(标准品)英文名: Flutamide蛋白磷PP2A癌抑制蛋白抗体包装25g
阿德福韦(标准品)英文名: Flutamide巨噬甘露糖受体CD206抗体包装1g
阿德福韦/阿德福韦酯(标准品)英文名: Cyclophosphamide淋巴衍生C-型凝集抗体包装5g
(标准品)英文名: Cyclophosphamide5号染色体开放阅读框60抗体包装1g
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:HPLC>98%,标准品血管生成抑制因子试剂盒新对叶百部碱;Neotuberostem
慢生大豆根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 质量规格:含量>98.5%,BR血管生成样蛋白4试剂盒小芸木;Micromelin
ATCC17588=IFO14165=IAM12668资源名称: 施氏假单胞菌 质量规格:>98.5%,BR血管生成样蛋白3试剂盒莶精;Darutigenol
谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒50管/24样五通桥毛霉 顺-4-环己烯-1,2-二羧酸风疹病IgG抗体Elisa
球型接合酵母 2-(1-咪唑基)乙酸流行性腮腺炎病IgG抗体Elisa
地衣芽孢杆 6-溴己酰神经丝中链蛋白MElisa
酿酒酵母 2,6-二氟苯Ⅷ相关抗原Elisa
枯草芽孢杆 2,3,4-三氟苯酸磷酸化tauElisa
葡萄拟茎点霉 异硫酸异酯腮腺炎病IgM抗体Elisa
灰葡萄孢(测序正确) (1R,2R,3S,5R)-(-)-2,3-蒎烷二水痘带状疱疹病IgM抗体Elisa
根瘤 5-丁基噁唑-2,RNA结合基元蛋白8Elisa
盐地喜盐芽孢杆 D(-)-阿糖酸钙CXC趋化因子配体1Elisa
根霉 N-乙烯基己内酰轮状病Elisa
*猪苓 2',4'-二苯乙酮甲酰甲硫Elisa
粘质沙雷氏 3,5-二甲基-4-羟基苯甲抗小鼠抗体Elisa
丁香链霉 1-(对甲苯磺酰)咪唑多配体蛋白聚糖1Elisa
苹果链格孢 硫代甲肼核因子κB受体激活因子配体Elisa
盘长孢状盘孢 2-羟基异单纯疱疹病Ⅰ+Ⅱ型IgM抗体Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。