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生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS632185 |
商品介绍:
测定意义: 多胺氧化酶是催化生物体内多胺氧化的关键酶,通过调节体内多胺水平和生成物的浓度,参与各种植物体对逆境胁迫的反应和生长发育过程。 测定原理: PAO催化多胺氧化产生过氧化氢,在过氧化氢酶存在的条件下与底物显色,在550nm下有特征吸收峰,通过测定吸光值增加速率来反映PAO活性。 需自备的仪器和用品: 分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
奥沙坦酯英文名: Epirubicin HCl磷化CREB-1抗体包装5g
倍他洛尔英文名: Eptifibatide Acetate磷化CREB-1抗体包装1g
磺地平英文名: Erlotinib hcl 磷化周期依赖性激6抗体包装250mg
达比加群英文名: Erlotinib hcl 原癌基因CBL2抗体包装100mg
达比加群酯英文名: Ertapenem sodium磷化原癌基因CBL2抗体包装25mg
达肝/达替肝钠英文名: Estradiolβ链接相互作用蛋白1抗体包装25g
丹曲林钠英文名: Estradiol磷化β链接相互作用蛋白1抗体包装5g
单硝异山梨酯英文名: Estriol磷化β 连环蛋白抗体包装1g
英文名: Estriol叶绿体蛋白抗体(植物)包装1g
洛地平/地平英文名: Etoposide磷化后期促进复合蛋白3抗体包装5g
伐他钠英文名: Etoposide磷化丝切蛋白抗体包装100g
富马英文名: Etoposide磷化丝切蛋白抗体包装25g
肝钠/肝磷脂钠盐英文名: Exemestane磷化周期检测点激2抗体包装5g
环贝特英文名: Exenatide Acetate/Exendin-4磷化分裂周期蛋白25抗体包装10MG
吉罗齐英文名: Finasteride磷化分裂周期蛋白25抗体包装1g
米曲霉Aspergillus│oryzae 质量规格:含量测定试剂盒异鼠李;Isorhamnetin
青霉Penicillium│sp. 质量规格:>98%,BR,USP31一氧化碳试剂盒羽扇豆;Lupeol
弯曲假单胞菌Pseudomonas│geniculata 质量规格:HPLC>98%,标准品一氧化氮试剂盒异去蟛蜞菊内酯;Demethylwed
多胺氧化酶(PAO)测试盒50管/48样大肠埃希氏杆 磺哒鼻病Elisa
海神弧 环氧大豆油Elisa
谷棒杆 高效氟菊酯P22cr蛋白Elisa
茯苓 唑酮钙蛋白抑Elisa
运动发酵单孢* 雄烯二酮钙蛋白Elisa
短裙竹荪东北变种* 二十六烷CD10分子Elisa
金黄壳囊孢 环唑CD26分子Elisa
乳酸杆 托洛尔核转录因子p50Elisa
长枝木霉 头孢呋辛钠干扰调节因子3Elisa
黑平188 己定中性粒透明质酸Elisa
浅灰绿色链霉 亚麻酸金属蛋白组织抑制因子Elisa
白肉迷孔 邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯整合α6Elisa
印度毛壳 芬苯达唑整合β4Elisa
烟管 2--3-甲基吡整合β5Elisa
苹果链格孢(苹果斑点落叶病) 环吡司整合β3Elisa