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生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS632152 |
商品介绍:
测定意义: 脂质过氧化是动植物体内活性氧(ROS)氧化生物膜的过程,脂质过氧化物(LPO)是脂质过氧化过程的产物,即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成LPO,使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。因此,LPO常被作为机体氧化应激的一种指标,与某些疾病的病理过程,如肿瘤、化学中毒、感染、炎 症、自身免疫疾病、动脉粥样硬化(AS)及心脑血管疾病,以及衰老等生理过程密切相关。 测定原理: LPO在酸性条件下加热,产生小分子终产物MDA,MDA与硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在535nm有最大吸收峰。 需自备的仪器和用品: 酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
上皮中性粒细胞激活肽78(ENA78)英文名:ENA78 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白25抗体包装500mg
上皮性钙黏附蛋白(CDHE)英文名:CDHE ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白28A抗体包装1g
上皮型脂肪结合蛋白(FABP5)英文名:FABP5 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白28B抗体包装5g
杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)英文名:BPI ELISA Kit肿瘤/抗原74抗体包装1g
色胺羟化2(TPH2)英文名:TPH2 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白38抗体包装25g
色胺羟化1(TPH1)英文名:TPH1 ELISA Kit7号染色体开放阅读框72抗体包装5g
三叶因子3(TFF3)英文名:TFF3 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白42抗体包装100g
三叶因子2(TFF2)英文名:TFF2 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白47抗体包装25g
三肽基肽Ⅰ(TPP1)英文名:TPP1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白43抗体包装5g
三磷腺苷(ATP)英文名:ATP ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白46抗体包装1g
三磷肌(IP3)英文名:IP3 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白63抗体包装1g
朊病毒蛋白(PRNP)英文名:PRNP ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白54抗体包装5g
软骨关联蛋白(CRTAP)英文名:CRTAP ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白61抗体包装100ml
软骨寡聚基质蛋白(COMP)英文名:COMP ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白8抗体包装25ml
乳脂球表皮生长因子8(MFGE8)英文名:MFGE8 ELISA Kit神经酰激CERK抗体包装100g
: AS3.2783资源名称: 泡盛曲霉 质量规格:纯度> 98%,BR,可用于培养转化生长因子β激蛋白22试剂盒紫檀芪;Pterostilbene
平滑假丝酵母Candida│parapsilosis 质量规格:HPLC>98%,标准品转化生长因子β3试剂盒竹节参皂苷IVa;Chikusetsu
普通变形杆菌Proteus│vulgaris 质量规格:纯度>98%,BR,可用于培养转化生长因子β2试剂盒梓;Catalponol
脂质过氧化物(LPO)测试盒100管/96样枯草芽孢杆 2,3-二羟基萘-6-磺酸钠血管内皮生长因子受体1Elisa
酿酒酵母 双芬酸血管内皮生长因子受体2Elisa
枯草芽孢杆 2-氨基-4-溴甲酯血管内皮粘附分子1Elisa
热带假丝酵母 一频哪酮血管内皮抑Elisa
溜曲霉 2-氨基-3-溴吡啶血管黏附蛋白Elisa
栖藻海杆状 3-基甲酯血管生成1Elisa
西蕃莲茎基腐病 (S)-(-)-Alpha-氨基-Gamma-丁内酯盐血管生成2Elisa
芽孢杆 高酸镍(II)六水合物, Reagent Grade血管生成受体酪激2Elisa
山柑芽孢杆 Fmoc-L-正缬血管生成样蛋白2Elisa
假单胞属 2-甲基-4-硝基吡啶血管生成样蛋白3Elisa
绳状篮状 2-苯甲酰噻吩血管生长Elisa
Bacillus (4-)苯血管性血友病因子Elisa
金针菇—HP3 六水合磷酸镁血红蛋白Elisa
黑孢霉 酸镍六水合物血红蛋白CElisa
大肠埃希 化钕六水合物血红蛋白FElisa