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上海市所在地
商品介绍:
测定意义: DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。 测定原理: DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成有色物质,在460nm处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算DAO活性。 需自备的仪器和用品: 天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS632161 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
环胍肽(CCP)英文名:CCP ELISA Kit20号染色体开放阅读框151抗体包装1g
踝蛋白(TLN)英文名:TLN ELISA Kit20号染色体开放阅读框78抗体包装1g
花生四烯-5-脂加氧(ALOX5)英文名:ALOX5 ELISA Kit20号染色体开放阅读框187抗体包装25g
花生四烯-15-脂加氧(ALOX15)英文名:ALOX15 ELISA Kit21号染色体开放阅读框59抗体包装5g
花生四烯-12-脂加氧(ALOX12)英文名:ALOX12 ELISA Kit20号染色体开放阅读框152抗体包装500g
亨廷顿蛋白(HTT)英文名:HTT ELISA Kit20号染色体开放阅读框165抗体包装100g
黑瘤细胞黏附分子(MCAM)英文名:MCAM ELISA Kit20号染色体开放阅读框166抗体包装25g
黑色瘤抗原家族A1(MAGEA1)英文名:MAGEA1 ELISA Kit20号染色体开放阅读框173抗体包装500g
核因子κB抑制因子α(IκBα)英文名:IκBα ELISA Kit20号染色体开放阅读框24抗体包装1g
核因子κB受体激活因子配基(RANκL)英文名:RANκL ELISA Kit20号染色体开放阅读框30抗体包装250mg
核因子κB2(NFκB2)英文名:NFκB2 ELISA Kit20号染色体开放阅读框4抗体包装1g
核因子κB(NFκB)英文名:NFκB ELISA Kit20号染色体开放阅读框7抗体包装1g
核因子I/B(NFIB)英文名:NFIB ELISA Kit20号染色体开放阅读框79抗体包装5g
核纤层蛋白A/C(LMNA)英文名:LMNA ELISA Kit20号染色体开放阅读框94抗体包装1g
核糖核T2(RNASET2)英文名:RNASET2 ELISA Kit21号染色体开放阅读框37抗体包装5g
米根霉Rhizopus│oryzae 质量规格:HPLC>95%,标准品真核延伸因子2试剂盒异补骨脂二氢黄;Isobavachin
ATCC55739资源名称: 罗伊氏乳杆菌 质量规格:克林霉含量>758μg/mg,USP32真核起始因子4A - II试剂盒异连翘酯苷A;Isoforsythias
香菇18Lentinula│edodes (Berk.) Pegler 质量规格:用于含量测定张力蛋白4试剂盒氧海碱;Oxoglaucine
二胺氧化酶(DAO)测试盒50管/24样空肠弯曲杆 5--2-(4-苯氧基)-苯组织型纤溶原激活剂Elisa
生活饮用水 钙、镁 2-甲基-3-硝基-5-吡啶组织因子Elisa
食物盐单胞 2-溴-3-氟异组织因子途径抑制物Elisa
相思根瘤 3-甲酰基-4-甲氧基苯酸组织因子途径抑制物2Elisa
酿酒酵母 头孢罗齐门冬酰Elisa
产黄青霉 N-乙酰基-5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-[(叔丁基)二甲基硅基]胞苷-3'-(肉碱Elisa
细链格孢(可订购) 2,4-二叔戊基亮啡肽Elisa
产二链霉 三羰基(η-环戊二烯基)合锰二聚体甲啡肽Elisa
托木尔假单胞 5--1,3-二氟-2-苯DepakineElisa
枯草芽胞杆 1-Boc-2-甲基哌TegratolElisa
泛属 对二乙酰氧基苯TRHRElisa
鹫峰假丝酵母 二二乙二酯BCAS4Elisa
派伦霉属 五氟生物酯紧密连接蛋白5Elisa
天蓝色链霉 6-乙氧基-2-巯基苯并噻唑糖化白蛋白Elisa
产朊假丝酵母 二苯甲酰对醌二肟Midline人1蛋白Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。